【摘 要】
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蔗糖非发酵基因5号（Sucrose Non-Fermenting Gene Number 5,SNF5）作为SWI/SNF染色质重塑复合物的一个主要核心亚基,在黑色素瘤、恶性横纹肌瘤、家族性神经鞘瘤病、上皮样肉瘤等多种恶性肿瘤中均发生了SNF5的缺失或突变。免疫逃逸在肺癌的发生发展过程中起着重要的作用,且肺癌细胞通过多种机制逃避免疫系统的抗肿瘤反应。研究发现SNF5能够直接或者间接地阻断MYC与P
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蔗糖非发酵基因5号（Sucrose Non-Fermenting Gene Number 5,SNF5）作为SWI/SNF染色质重塑复合物的一个主要核心亚基,在黑色素瘤、恶性横纹肌瘤、家族性神经鞘瘤病、上皮样肉瘤等多种恶性肿瘤中均发生了SNF5的缺失或突变。免疫逃逸在肺癌的发生发展过程中起着重要的作用,且肺癌细胞通过多种机制逃避免疫系统的抗肿瘤反应。研究发现SNF5能够直接或者间接地阻断MYC与PD-L1启动子结合,来发挥抑制肿瘤免疫逃逸的作用。但是,SNF5调控肺癌免疫逃逸的机制目前尚不清楚。因此基于此问题,本课题以人非小细胞肺癌细胞A549、NCI-H1299为实验研究对象,首先通过TCGA数据库分析了肺癌组织和正常肺组织中SNF5的表达水平,并且分析了SNF5的表达水平高低与肺癌患者生存期（OS）之间的关系;其次,分别在两种肺癌细胞系A549和NCI-H1299中通过过表达或敲低SNF5后,利用Western blot和q RT-PCR技术检测免疫逃逸相关因子的表达水平来探究SNF5对肺癌细胞免疫逃逸的影响;因为在A549细胞中过表达SNF5后能够激活STAT3发生磷酸化,所以接下来在A549细胞中过表达SNF5后加入P-STAT3抑制剂S3I-201后,探究SNF5是否通过P-STAT3信号通路调控肺癌细胞免疫逃逸进程;最后,分别在A549细胞中过表达SNF5和NCI-H1299细胞中敲低SNF5后,通过Western blot、q RT-PCR和CCK8技术检测增殖相关因子的表达水平以及肺癌细胞的增殖能力。主要的研究结果和结论如下:研究结果:（1）SNF5在肺癌组织中高表达,且高表达SNF5的肺癌患者较低表达SNF5的肺癌患者总体生存期缩短。（2）SNF5在NCI-H1299细胞中的表达水平明显高于A549细胞。在A549肺癌细胞中过表达SNF5能够上调免疫逃逸相关因子PD-L1、PD-L2、IDO1和TGFβ1的表达水平。且在NCI-H1299肺癌细胞中敲低SNF5能够抑制PD-L1、PD-L2、IDO1和TGFβ1的表达水平。（3）过表达SNF5能够上调A549肺癌细胞中P-STAT3、PD-L1、PD-L2的表达水平,而对STAT3的表达没有影响。敲低SNF5能抑制NCI-H1299肺癌细胞中P-STAT3、PD-L1、PD-L2的表达,同样对STAT3的表达也没有影响。因为过表达SNF5能够激活STAT3发生磷酸化,所以在过表达SNF5的A549肺癌细胞中加入P-STAT3抑制剂S3I-201后,SNF5上调PD-L1、PD-L2的作用被缓解或抑制,说明SNF5通过STAT3信号通路调控PD-L1/PD-L2的表达进而参与肺癌免疫逃逸进程。（4）过表达SNF5能促进A549肺癌细胞中周期蛋白Cyclin D1的表达,而抑制了P21的表达,从而增强A549肺癌细胞的增殖能力;相反敲低SNF5能在基因和蛋白水平上抑制NCI-H1299肺癌细胞中周期蛋白Cyclin D1的表达,而促进P21的表达,进而抑制NCI-H1299肺癌细胞的增殖。
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