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目的:建立包括D3S1358、D13S317、D7S820、CSF1PO、D16S539、D12S391、D18S51、Amelogenin、D5S818和FGA10个STR基因座的荧光标记复合扩增体系,探讨该体系用于检测造血干细胞移植嵌合体的可行性。方法:选取D3S1358、D13S317、D7S820、CSF1PO、D16S539、D12S391、D18S51、Amelogenin、D5S818和FGA10个STR基因座。D3S1358、D13S317、D7S820、CSFIPO上游引物的5’端用6-FAM标记,D16S539、D12S391、D18S51上游引物的5’端用HEX标记,Amelogenin、D5S818、FGA上游引物的5’端用TAMRA标记。优化STR基因座复合扩增体系中的引物浓度、DNA模板浓度、退火温度、循环次数等参数,建立最佳复合扩增体系。运用传统的制备方法,制备10个STR基因座常见基因型的等位基因分型标准物。分析本方法与Sinofiler试剂盒所检测的等位基因的一致性;检测DNA灵敏度;制备体外模拟嵌合体样本,分析每组测得的嵌合率平均值与理论嵌合率的差异;进行重复性实验;比对本方法与Sinofiler试剂盒检测造血干细胞移植标本嵌合体的相关性。结果:建立了10个STR基因座的复合扩增体系:总体积25μL,10′Go Taq Buffer5μL,2.5mmol/L d NTP3μL,10μmol/L的各基因座D3S1358、D13S317、D7S820、CSF1PO、D16S539、D12S391、D18S51、Amelogenin、D5S818、FGA引物分别为0.5μL、0.4μL、0.7μL、0.55μL、0.45μL、0.5μL、0.5μL、0.6μL、0.7μL、0.7μL,Go Taq DNA聚合酶0.3μL、10ng/μL的DNA 3μL,去离子水8.1μL。热循环参数:95℃5min;94℃45s,59℃45s,72℃45s,30次循环;60℃55min;15℃∞。用本方法和Sinofiler试剂盒检测423份样本等位基因分型结果完全一致。该体系能检测最低DNA浓度为0.4 ng/μL。模拟嵌合体样本,最小检出的供者嵌合率范围为2.5%-5%。r=0.998,回归方程y=0.9835x+0.7829 R2=0.997。批内和批间重复性实验,结果显示标准差均小于2%,批内变异系数为3.75%,批间变异系数为1.23%-7.97%。用本方法和Sinofiler试剂盒检测104份造血干细胞移植后嵌合体样本,两方法的r=0.997,线性回归方程y=1.0108x-0.8418 R2=0.9941。结论:成功构建了D3S1358、D13S317、D7S820、CSF1PO、D16S539、D12S391、D18S51、Amelogenin、D5S818和FGA10个STR基因座复合扩增体系,该体系可应用ABI3100检测平台,获得可靠的分型结果。本复合扩增体系可检测出造血干细胞移植嵌合体的供体嵌合率,灵敏度高、特异性强,完全能够满足临床需要。同时也为开发国产STR试剂盒打下了良好的基础。