【摘 要】
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本文研究目的：观察阴阳双补方(YY)及各拆方(核桃仁、玉竹HY，核桃仁、甘草HG，玉竹、甘草YG，核桃仁H，玉竹Y，甘草G)对H2O2所致PC12细胞氧化损伤的保护作用及其对PLC-γ1-PKCα-PLD信号转导通路的影响，研究补阳法、补阴法抗神经元细胞氧化损伤的机理，探讨阳虚、阴虚与氧自由基损伤和神经系统病变的关系。研究方法：采用PC12细胞为实验对象，用MTT法检测PC12细胞生存率，用公式(
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本文研究目的：观察阴阳双补方(YY)及各拆方(核桃仁、玉竹HY，核桃仁、甘草HG，玉竹、甘草YG，核桃仁H，玉竹Y，甘草G)对H2O2所致PC12细胞氧化损伤的保护作用及其对PLC-γ1-PKCα-PLD信号转导通路的影响，研究补阳法、补阴法抗神经元细胞氧化损伤的机理，探讨阳虚、阴虚与氧自由基损伤和神经系统病变的关系。
研究方法：采用PC12细胞为实验对象，用MTT法检测PC12细胞生存率，用公式(药物处理组OD值-模型组OD值)/(对照组OD值-模型组OD值)×100％计算细胞恢复率，筛选出适用的H2O2氧化损伤模型；用正交实验优选出疗效最好的方剂；设对照组和模型组，用阴阳双补方全方及其六个拆方处理细胞，在倒置显微镜下观察PC12细胞形态的改变，用Westernblot法检测其对PC12细胞PLC-γ1-PKCα-PLD信号转导通路各蛋白表达的影响。
研究结果：1.阴阳双补方全方及各拆方对H2O2所致PC12细胞氧化损伤有明显的保护作用，各组细胞形态差异不大，主要区别在于正常和死亡细胞的数量上，与模型组相比，阴阳双补方及各拆方均能提高受损细胞的生存率；2.阴阳双补方全方及各拆方对H2O2所致PC12细胞氧化损伤的保护作用以合方最强，其作用大小依次为：YY＞HG＞HY＞YG＞H＞Y＞G。3.Westernblot分析表明，与对照组相比，模型组PLC-γ1-PKCα-PLD信号通路的各蛋白表达水平均下降，当用IC50药物剂量处理受到H2O2攻击的PC12细胞时，阴阳双补方及各拆方能上调PLC-γ1-PKCα-PLD信号通路的各蛋白表达水平。
研究结论：1.阴阳双补方及各拆方对H2O2所致PC12细胞氧化损伤有保护作用，全方效果最好；补阴、补阳法的合用，尤其是佐使药甘草的应用使本方配伍合理，更好地发挥协同作用。2.H2O2所致的神经细胞氧化损伤是通过下调PLC-γ1、PKCα及PLD表达，部分阻断PLC-γ1-PKCα-PLD信号通路而抑制了细胞增殖、促进了细胞死亡。3.阴阳双补方全方及各拆方通过上调PLC-γ1-PKCα-PLD信号通路的各蛋白表达水平发挥其抗氧化损伤的功能。4.通过药效反证，以神经元氧化损伤为主要病理变化的神经系统疾病，其中医证型以阴阳俱虚居多，而阳虚又重于阴虚。5.阴虚、阳虚与PLC-γ1-PKCα-PLD信号表达和转导减弱密切相关。
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