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竹叶是我国传统中药,黄酮是其主要化学成分。研究表明竹叶中的黄酮类化合物有良好的抗炎功效,但其抗炎机制和物质基础并不清楚,本文将在前期竹叶抗炎作用的研究基础上,对竹叶黄酮的抗炎作用做深入研究并阐明其物质基础。为优化竹叶中总黄酮的提取工艺,通过正交试验优选竹叶的浸提工艺条件。运用L9(34)正交试验对竹叶黄酮浸提工艺条件进行优化,以总黄酮的含量为检测指标,选取芦丁作为对照品,采用紫外分光光度法测定竹叶提取液中总黄酮含量。结果表明以70%甲醇溶液作为提取溶剂,料液比1:10,每次提取24小时,共提取3次为竹叶黄酮的最佳浸提工艺。为纯化竹叶中的黄酮类化合物,以MCI-GEL CHP20P填料洗脱竹叶黄酮提取物,湿法上样,上样浓度0.66g/ml,吸附流速为1BV/h,以80%甲醇溶液洗脱,洗脱流速为3BV/h,洗脱4柱体积,最后得到106g竹叶黄酮提取物干膏粉末;为分离竹叶黄酮的不同部位,以聚酰胺树脂分离竹叶黄酮提取物,湿法上样,吸附流速为1BV/h,依次用蒸馏水、10%甲醇、30%甲醇、50%甲醇、75%甲醇和100%甲醇洗脱,洗脱速度为2BV/h,每次洗脱3-5柱体积不等,最后得到蒸馏水洗脱部位34.5g、10%甲醇洗脱部位26.3g、30%甲醇洗脱部位7.7、50%甲醇洗脱部位8.6、75%甲醇洗脱部位5.1和100%甲醇洗脱部位1.1g。为测定竹叶不同部位洗脱流份中总黄酮的含量,采用紫外分光光度法进行测量,选取芦丁作为对照溶液,在507nm处测定竹叶不同位洗脱流份中总黄酮的含量。结果表明芦丁对照品线性关系良好,回归方程为Y=17.71X+0.0225,r=0.9989,线性范围为0.01mg-0.20mg,平均加样回收率为99.41%,RSD=1.3%(n=6)。此方法简便、准确、重现性好,竹叶不同部位洗脱流份中总黄酮的含量差异较大,流份1、流份2、流份3、流份4、流份5和流份6中总黄酮含量分别为76.16mg/g、138.35mg/g、467.77mg/g、604.46mg/g、797.26mg/g和300.95mg/g,为竹叶中黄酮类化合物的进一步研究提供了科学依据。通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验观察竹叶各提取部位抗炎作用。结果表明,地塞米松(dxm)组、流份2至流份5组均对小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用,与空白对照组比较有极显著差异(p<0.01),其对小鼠耳廓肿胀抑制率依次为:61.88、64.57%、77.13%、62.33%和83.41%,流份1组对小鼠耳廓肿胀有抑制作用,与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05),其对小鼠耳廓肿胀抑制率为43.50%,流份6组对小鼠耳廓肿胀无明显的抑制作用,与空白对照组比较无显著性差异(p>0.05)。通过醋酸致小鼠腹腔血管通透性增加试验观察竹叶各提取部位抗炎作用。结果表明,流份5组对小鼠毛细血管通透性的增加有明显的抑制作用,与空白对照组比较有极显著差异(p<0.01),其对小鼠毛细血管通透性增加的抑制率为66.73%,dxm组对小鼠毛细血管通透性的增加有抑制作用,与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05),其对小鼠毛细血管通透性增加的抑制率为53.62%,其余组分均对小鼠毛细血管通透性的增加无明显的抑制作用,与空白对照组比较无显著性差异(p>0.05)。通过小鼠气囊滑膜炎试验观察竹叶各提取部位抗炎作用。结果表明,dxm组、流份5组均对小鼠气囊滑膜炎有明显的抑制作用,与空白对照组比较有极显著差异(p<0.01),其对小鼠气囊滑膜炎抑制率依次为16.40%和19.55%,其余组分均对小鼠气囊滑膜炎无明显的抑制作用,与空白对照组比较无显著性差异(p>0.05)。通过小鼠肉芽肿试验观察竹叶各提取部位抗炎作用。结果表明,dxm组、流份5组均对小鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用,与空白对照组比较有极显著差异(p<0.01),对小鼠棉球肉芽肿抑制率依次为36.98%和38.52%,流份4组对小鼠棉球肉芽肿有抑制作用,与空白对照组比较有显著差异(p<0.05),对小鼠棉球肉芽肿抑制率为29.12%,其余组分均对小鼠棉球肉芽肿无明显的抑制作用,与空白对照组比较无显著性差异(p>0.05)。最后,选取流份5为竹叶抗炎有效部位。采用高效液相-高分辨飞行时间质谱(hplc-hr-tof/ms)技术,对流份5中的主要化学成分进行分析。采用ultimatexb-c18(5μm,3.0×150mm)色谱柱,以乙腈和水(含体积比0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,ESI-TOF-MS正负离子Auto MSn采集模式。通过HPLC-TOF-MS所得到的化合物分子量以及MS/MS CID碰撞解离碎片,结合文献报道,对流份5的主要化学成分进行分析鉴定。本试验通过对炎症反应小鼠动物实验,优选了竹叶最佳抗炎有效部位。通过对抗炎有效部位的物质基础的研究,分析了竹叶中的抗炎活性成分的化学结构,为进一步的研究提供科学依据。