论文部分内容阅读
目的:比较和分析氯沙坦及其活性代谢物E-3174在汉族、蒙古族、朝鲜族、回族和维吾尔族五个民族健康受试者体内的药动学过程;并以5个民族的血药浓度数据为基础,采用非线性混合效应模型程序(nonlinear mixed-effect modeling, NONMEM)建立氯沙坦及其活性代谢物E-3174群体药动学模型,并进一步确定可能会对药物及其活性代谢物的药动学特征产生影响的协变量;考察药代酶细胞色素P450同工酶2C9的2位点(CYP2C9*2)基因多态性在中国维吾尔族和回族健康人群的分布频率及其对氯沙坦药动学的影响,为氯沙坦的临床合理化用药提供科学的理论依据。方法:采用高效液相-荧光检测方法,50名中国汉族、蒙古族、朝鲜族、回族和维吾尔族健康受试者(每个民族10名)单剂量口服氯沙坦钾片50 mg,给药后24 h内设置14个采血点;应用DAS 2.0程序估算药动学参数并采用SPSS 16.0软件以不同民族为考察因素对药动学参数进行单因素方差分析(One-Way ANOVA)和非参数检验(Nonparametric Test)。对于收集得到的50名健康受试者650个血药浓度数据,应用NONMEM程序建立氯沙坦及其活性代谢物E-3174的基本模型和最终模型,求算群体药动学参数值。考察人口统计学指标、生化指标等相关因素对群体药动学参数的影响,并进行模型验证。采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态(Polymerase chain reaction-Restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法检测214例维吾尔族和164例回族健康受试者CYP2C9*2基因多态性,计算等位基因突变频率;并在回族受试者中选择8名CYP2C9*1/*1野生型受试者和6名CYP2C9*1/*2突变杂合型受试者单剂量口服氯沙坦钾片剂并采集样品、测定血药浓度,应用DAS 2.0程序估算药动学参数,采用SPSS16.0软件以不同基因型为考察因素对药动学参数进行独立样本T检验(Independent-Samples TTest)和非参数检验,考察药代酶不同基因型对氯沙坦在人体内药动学过程的影响。结果:汉族、蒙古族、朝鲜族、回族和维吾尔族健康受试者氯沙坦药动学参数如下,Cmax:(351.0± 167.8)、(438.4±254.3)、(524.1 ±348.8)、(611.1 ±418.5)和(344.2± 153.4)ng·mL-1;tmax: (1.34 ±1.06)、(1.58 ±0.87)、(0.89 ±0.40)、(1.16 ± 0.64)和(1.03 ±0.28) h; t1/2: (0.82±0.40)、(1.91 ±1.15)、(1.46±0.43)、(1.57± 1.71)和(1.03±0.43)h; Vd: (115.2±43.4)、(159.3 ± 93.2)、(164.8±91.7)、(139.5± 141.4)和(123.3±41.9) L; CL: (106.5 ± 36.3)、(62.4±42.0)、(79.9±38.2)、(67.7± 17.7)和(87.4±26.2)L·h-1;AUC(0-∞): (523.3 ± 183.9)、(944.4 ±338.1)、(830.8±224.9)、(853.0±223.2)和(631.9±242.3) ng·h·mL-1。蒙古族 t1/2与汉族t1/2差异有显著性意义,其它药动学参数经体质量校正后差异无显著性意义。活性代谢物E-3174在汉族、蒙古族、朝鲜族、回族和维吾尔族健康受试者体内的药动学参数如下,Cmax: (241.9 ±60.1)、(357.6 ± 169.9)、(493.0 ±188.0)、(463.2 ± 134.1)和(476.7± 165.6ng·mL-1;tmax: (3.60 ± 1.60)、(3.75 ± 1.86)、(2.40 ±0.81)、(2.80 ±0.79)和(2.60± 0.52)h; t1/2: (4.65 ± 1.10)、(4.38 ± 0.68)、(3.08 ±0.70)、(3.39 ±0.92)和(2.94 ±0.81) h; Vd:( 170.6±30.5)、(127.4 ± 32.5)、(87.6 ± 14.8)、(87.9 ±17.6)和(91.8 ±32.9) L; CL: (25.7 ±2.5)、(20.3 ±4.9)、(20.6 ±5.5)、(18.4 ± 3.5)和(21.5 ±4.8) L·h-1; AUC(0-∞): (1960.9 ± 181.9)、(2602.7±668.3)、(2607.7±765.6)、(2811.4±581.4)和(2429.4±552.4) ng·h·mL-1。汉族和蒙古族的t1/2与其它三个民族的t1/2差异有显著性意义,经体质量校正后,汉族和蒙古族的Vd和Cmax与其它三个民族相比,差异有显著性意义。应用NONMEM程序,经正向模型化过程和逆向模型化过程得氯沙坦及E-3174群体药动学最终模型如下:氯沙坦:(CL10/F)i= 12.9×θRACE1,3,5-cL10× eηCL10,i(L·h-1)(V1/F)i= 29.2 × θRACE4,5-v1 × eηv1,i(L)(CL2/F)i= 27.6 × θRACE1,3.4,CL2× eηCL2,i (L·h-1)Kai= 1.89 ×eηKa,i(h-1)(V2/F)i=83.9 × eηV2,i(L)Kti= 1.25 × θRACE3,4,5-Kt× eηKt,i代谢物E-3174:(CL3/F)i= 14.1 ×eηCL3,i (L·h-1)(V3/F)i=63.3 × eηV3,i(L)(CL4/F)i= 14.6 ×eηCL4,i (L·h-1)(V4/F)i= 33.9 × eηV4,i(L)经分析,民族因素对氯沙坦的中央室非E-3174代谢清除率CL10,中央室表观分布容积V1,周边室清除率CL2和E-3174的转化速率常数Kt有显著影响。采用PCR-RFLP方法检测214例维吾尔族和164例回族健康受试者血样,结果在维吾尔族受试者中发现野生型纯合子CYP2C9*1/*1 176例,突变型杂合子CYP2C9*1/*235例,突变型纯合子CYP2C9*2/*2 3例,等位基因突变频率9.58 %;在回族受试者中发现野生型纯合子CYP2C9*1/*1 149例,突变型杂合子CYP2C9*1/*2 15例,突变型纯合子CYP2C9*2/*2 0例,等位基因突变频率4.57 %,且符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。CYP2C99*1/*1与CYP2C9*1/*2基因型回族受试者单剂量口服氯沙坦钾片后的氯沙坦主要药动学参数分别为:Cmax: (498.6±226.0)和(420.3 ±186.5) ng·mL-1; t1/2: (1.06±0.33)和(1.39±0.43) h;AUC(0-24): (903.4±286.2)和(946.3±349.3) ng·h·mL-1; AUC(0-∞): (946.8±307.0)和(996.0±332.1)ng·h·mL-1。E-3174 主要药动学参数分别为:Cmax: (389.4±109.7)和(237.5±90.6)ng··mL-1;t1/2: (3.84±0.70)和(4.79±1.25)h; AUC(0-24): (2378.4±490.1)和(1744.0±431.9)ng·h·mL-1; AUC(0-∞): (2420.9 ±494.0)和(1828.0 ±457.3) ng·h·mL-1。所有药动学参数采用SPSS16.0软件进行统计学分析,结果显示,CYP2C9*1/*1型和CYP2C9*1/*2型受试者E-3174的AUC(0-24)、AUC(0-∞)和Cmax差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:五个不同民族健康受试者单剂量口服氯沙坦钾片后,民族因素在某种程度上影响了氯沙坦及其活性代谢物E-3174的药代动力学过程;采用NONMEM法建立了氯沙坦及其活性代谢物E-3174群体药动学模型,并发现民族因素影响氯沙坦的清除及氯沙坦向E-3174的转化率;CYP2C9基因多态性对氯沙坦药动学过程有显著性影响,其突变等位基因可能减少氯沙坦活性代谢物E-3174的生成。