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本实验对分离到的49株菌进行SDS-PAGE全细胞蛋白电泳,并对每个类群代表菌株做了16S rDNA序列分析;选用6株具有固氮酶活性菌,优化芽孢杆菌生物肥料培养基;确定最佳发酵条件;测定芽孢杆菌生物肥料对盆栽油麦菜(香油麦)品质的影响,为进一步研制可应用于生产的促生菌剂提供理论基础。结果如下:
1、固氮芽孢杆菌的分离及聚类:本实验分离到49株芽孢杆菌,其中六株具有固氮酶活性,lxll活性达到73.084(nmol C2H2mL-lh-l),六株选用菌株革兰氏染色均呈现阳性;利用SDS-PAGE蛋白电泳在85%的相似性水平上聚为4个较大类群;
2、16S rDNA序列测序结果:将各类群代表菌株所测得的16S rDNA序列在NCBI上进行BLAST,可知:其中1x2-7与Bacillus firmus lx2-10与Bacillus sp、1x2-12与Bacillus sp.、1x11与Bacillus subtilis、 1x1-1与Bacillus oleronius、1x1与Bacillus pumilus相似性为99%;1x1-3与Oceanobacillus caeni、1x2-6与Bacillus megaterium相似性为98%;1x1-2与Sporosareina luteola、1x2-1与Bacillus licheniformis相似性为97%。
3、芽孢杆菌生物肥料培养基及发酵条件的优化:结合单因素试验和正交试验,通过OD值比浊法测定发酵上清液,确定芽孢杆菌生物肥料的最佳碳源、氮源、无机盐及其浓度、培养条件,最终优化配方是:玉米粉4%,黄豆粉6%,NaC13.5%,种龄16h,pH为7.0,39℃培养24h。
4、芽孢杆菌生物肥料对盆栽油麦菜生长的影响:实验组硝酸还原酶和可溶性糖含量比对照组含量分别提高了73.68%和20.42%,t检验都达到显著水平;实验组叶绿素比对照高36.43%,t检验则达到极显著水平。