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第一部分、EGFRvA通过磷酸化STAT5b促进卵巢癌生长和卡铂耐药 目的：新型表皮生长因子受体异构体EGFRvA能够促进胶质瘤细胞在体内和体外的转移能力，但是EGFRvA在卵巢癌发生发展以及对药物治疗的反应性等方面的发挥的作用处于未知状态。在本项研究中，我们分析了EGFRvA与人上皮性卵巢癌分期和预后的相关性，同时还研究了过表达EGFRvA对人上皮性卵巢癌发生发展以及对药物治疗的反应性等方面的作用。 方法：首先研究了EGFRvA在人上皮性卵巢癌细胞系和上皮性卵巢癌患者中的表达情况。通过慢病毒感染方法，将pWPT-GFP、pWPT-EGFRwt和pWPT-EGFRvA慢病毒表达载体分别在人上皮卵巢癌细胞系CAOV3、SKOV3ip1、HEY中过表达，建立稳转细胞系。通过CCK-8检测各组细胞的增殖和卡铂耐药情况。蛋白印迹法检测EGFR的磷酸化位点以及经典的下游通路，通过 siRNA的方法和联合用药以及实时荧光定量 PCR的方法检测关键分子的下游。 结果：EGFRvA在大多数人上皮性卵巢癌细胞系中均有表达，且与卵巢癌患者的分期呈正相关。过表达EGFRvA可以促进卵巢癌细胞增殖和卡铂耐药。EGFRvA主要是通过磷酸化Y845这一位点，进而提高下游Stat5b的磷酸化水平，且过表达EGFRvA可以提高Stat5的下游分子Cyclin A1等基因的表达水平。联合应用Stat5的抑制剂或者采用siRNA瞬时敲降卵巢癌细胞中的Stat5，可以抑制细胞增殖和卡铂耐药。 结论：EGFRvA可以通过Y845磷酸化位点激活STAT5b,进而发挥促进卵巢癌增殖和卡铂耐药的功能。 第二部分、新型表皮生长因子受体异构体EGFRvA促进胶质瘤U87MG细胞迁移及其机制探讨 目的：研究新型表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）异构体EGFRvA对人脑星形胶质母细胞瘤U87MG细胞迁移的影响，并深入探讨其可能的机制。 方法：首先将pWPT-GFP（空白对照）、pWPT-EGFRwt（阴性对照）和pWPT-EGFRvA慢病毒表达载体分别与慢病毒包装质粒pSPAX2和pMD2.G一起共转染293T细胞，获得慢病毒颗粒，然后感染胶质瘤U87MG细胞，建立U87MG GFP、U87MG EGFRwt和U87MG EGFRvA细胞系。采用蛋白质印迹法和FCM法验证EGFRwt和EGFRvA分别在感染后的细胞中成功过表达。采用Transwell小室实验检测各组细胞迁移能力的变化。实时荧光定量PCR法验证前期基因芯片技术筛选出的各组细胞之间表达水平有明显变化的52个基因的mRNA水平，并用蛋白质印迹法检测其中有显著差异的4个mRNA的蛋白水平。 结果：稳定感染U87MG细胞后，U87MG EGFRwt和U87MG EGFRvA细胞中分别过表达EGFRwt和EGFRvA。相较于EGFRwt过表达组，过表达的EGFRvA更能促进U87MG细胞发生迁移（P＜0.001）。U87MG EGFRvA细胞中癌基因FBLN2和ROBO1的mRNA水平高于U87MG EGFRwt细胞，而抑癌基因CDH13和SOX2表达水平则明显下调（P＜0.05）。在蛋白质水平上，U87MG EGFRvA细胞中与肿瘤转移相关的CDH13和SOX2表达水平也明显下调（P＜0.05）。 结论：EGFRvA过表达可以促进人脑星形胶质母细胞瘤U87MG细胞的迁移，它可能是通过影响肿瘤细胞中FBLN2、ROBO1、CDH13和SOX2基因的表达来发挥作用。