【摘 要】
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由柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)是危害柑橘的重要病原,侵染柑橘后引起叶片畸形等症状,该病毒在我国乃至世界范围内发生普遍,给农业经济生产带来重大损失。目
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由柑橘碎叶病毒(Citrus tatter leaf virus,CTLV)是危害柑橘的重要病原,侵染柑橘后引起叶片畸形等症状,该病毒在我国乃至世界范围内发生普遍,给农业经济生产带来重大损失。目前国内外对其研究主要集中在CTLV的基因组表达策略以及CTLV的分子生物学特性方面,而对于CTLV侵染循环史以及致病分子机理却不清楚。外壳蛋白(CP)和运动蛋白(MP)作为病毒重要的结构蛋白在病毒的侵染循环史以及致病机理往往起着重要的作用。本研究利用农杆菌介导瞬时表达方法对CTLV CP和MP在本氏烟(N. benthamiana)中的亚细胞定位进行研究,为进一步揭示CTLVCP和MP的功能奠定基础。本研究取得主要结果如下：1.以CTLV-STO (GenBank登录号为JQ765412)侵染性克隆质粒为模板,PCR扩增获得CTLV CP和MP基因。采用gateway技术分别构建至植物表达载体pMW390(带YFP标签)和pMDC45(带GFP标签),热击转化农杆菌GV3101菌株；2.真空渗透注射农杆菌侵染本氏烟植株,接种3d后,激光共聚焦显微镜观测目标基因与荧光蛋白标签融合蛋白在本氏烟中的瞬时表达结果显示：CTLV CP在本氏烟叶细胞中亚细胞定位分布在细胞核和细胞膜(或细胞壁),CTLVMP在本氏烟叶细胞中亚细胞定位分布在细胞膜(或细胞壁)。研究中使用到的带不同荧光标签两种植物表达载体,观测到CP在本氏烟叶细胞中分布相一致。
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