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荧光DNA传感器是一种新型的检测手段,近年来在生物、化学、医药等领域应用十分广泛,具有重要的研究价值,吸引了广大学者关注。微球负载型DNA传感器不仅可以单独用于DNA的检测,而且还可以用于构建基于光子晶体结构的微球阵列型传感器,从而得到可方便携带的DNA传感器。本文使用CdTe量子点和金纳米粒子(AuNPs)分别为能量供体与能量受体,并利用有机和无机两种微球作为载体,制备了符合荧光共振能量转移(FRET)原理的微球负载型荧光DNA传感器(荧光DNA探针),并对其DNA检测性能进行了研究。
有机聚合物载体聚(二甲基丙烯酸乙二醇酯-甲基丙烯酸β-羟乙酯)(Poly(EGDMA-co-HEMA))微球,使用甲基丙烯酸β-羟乙酯(HEMA)为功能单体,二甲基丙烯酸乙二醇酯(EGDMA)为交联剂,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,乙腈为溶剂,通过蒸馏沉淀聚合法得到。通过改变交联剂的用量,得到了粒径均一、表面呈光滑圆形的微球。使用硅烷偶联剂γ-氨丙基甲基二乙氧基硅烷(APDEMS)对微球表面的活性羟基进行改性,使其转化为氨基,从而可以与荧光DNA探针相连接。所得Poly(EGDMA-co-HEMA)微球固载型荧光DNA传感器的猝灭效率为85%,当检测体系中存在完全互补的目标DNA时,体系的荧光恢复率为探针体系的2倍。
采用Stober法制备了无机SiO2微球,其粒径为365 nm,表面呈光滑圆形。由于其表面含有大量活性羟基,因此也可以用硅烷偶联剂APDEMS进行改性,得到表面含有活性氨基的SiO2微球。因此可以将荧光DNA探针固载于其表面,得到无机载体固载的DNA传感器,此时其荧光猝灭效率为86%,当体系中存在完全互补的目标DNA时,其荧光恢复率为探针体系的3.4倍。
由于以无机SiO2微球为载体固载荧光DNA传感器时,其荧光猝灭效率和荧光恢复率都较以有机Poly(EGDMA-co-HEMA)微球做载体时高,因此,无机SiO2微球更适于用做微球固载性DNA传感器的载体。