手性酯酶产生菌的筛选、培养及应用研究

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从土壤中分离得到370株产酯酶菌株,经反复筛选,从中挑选出一株酶活及选择性均较高的菌株YQ231.经生理生化实验鉴定该菌株为不动杆菌属(Acinetobacter sp.).对不动杆菌YQ231进行培养条件优化,得到最佳培养条件为:接种量6﹪,发酵起始pH8.0,温度30℃;产酶的最佳培养基组成为:蔗糖9g/L,YDJ1 1.5g/L,黄豆饼粉20g/L,(NH<,4>)<,2>SO<,4>2g/L,K<,2>HPO<,4>2g/L,NaCl 1g/L,MgSO<,4>·7H<,2>O 0.2g/L,经优化后其在摇瓶中酯水解酶产量提高近10倍.经优化得到最佳反应条件为:pH8.5,温度30℃及加入1.5﹪的TJJ1.研究表明,降低温度和底物浓度均可以提高酶的对映选择性.考察发现,产物手性醇对酶反应有抑制作用.该酶优先水解R型手性酯,当底物浓度为250mM时,对映体选择率(E值)达50.
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