山楂和桃遗传多样性的RAPD分析及甜椒内质网小分子量热激蛋白基因的克隆与功能分析

来源 :聊城大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:xuhong
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本论文内容由三部分组成:山楂遗传多样性的RAPD分析,桃遗传多样性的RAPD分析和甜椒内质网小分量热激蛋白基因的克隆与功能分析。第一部分采用RAPD技术,探讨了山东境内的38个山楂种质的亲缘关系。从120个引物中筛选出17个引物对所选山楂种质的DNA样品进行PCR扩增,共得到252条谱带,205条具有多态性,多态性比率平均高达81.3%,其中特异性谱带37条,充分体现了山楂种质丰富的遗传多样性。并利用NTSYS软件和UPGMA法对扩增结果进行了种质间相似系数的计算及聚类分析,结果表明种质间相似系数在0.73~0.91之间,实生楂与其它山楂种质亲缘关系较远。本试验在取材、引物选择和PCR扩增程序上与前人都有所不同。本实验对山楂遗传多样性的RAPD分析丰富了该组植物系统学研究内容,为我国山楂种质资源的分子生物学方面的研究提供依据。第二部分以包括黄桃新品种‘黄金冠’在内7个品种为材料,利用RAPD技术对‘黄金冠’的起源进行了研究。从80个随机引物中筛选出15个重复性好、条带清晰的多态性引物对桃品系进行了PCR扩增,共扩增出84条谱带,扩增产物谱带数从3~10条不等,产物大小从250~3000 bp不等,表明以上桃品种具有丰富的遗传多态性。利用NTSYS软件和UPGMA聚类法对扩增结果进行了品种间相似系数的计算及聚类分析。结果显示品种间相似系数在0.78~0.86之间,其中黄桃19和其它桃品系亲缘关系最远,‘黄金冠’和锦黄2号的亲缘关系最近。桃遗传多样性的RAPD分析为一些特殊种质资源的开发利用及保存提供了理论依据。第三部分以温度敏感植物甜椒为试验材料,通过RT-PCR、3′-RACE和5′-RACE的方法成功克隆得到了甜椒内质网小分子量热激蛋白基因(ERsHSP),并利用BLAST、DNAMAN等软件对该基因与其它物种中的同源基因之间进行了核苷酸序列和氨基酸序列的分析,发现同源性分别高达74%和76%。并构建了表达载体,将ERsHSP基因转化烟草,结果表明ERsHSP基因可以提高转基因烟草植株的高温和低温抗性。为分析ERsHSP基因的生物学功能奠定了基础。
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