【摘 要】
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本文以香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4)为靶生物,从土壤中分离、筛选到一株对香蕉枯萎病菌具有较好拮抗作用的菌株--白g1,对白g1进行了菌株鉴定、发
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本文以香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp. cubense race 4)为靶生物,从土壤中分离、筛选到一株对香蕉枯萎病菌具有较好拮抗作用的菌株--白g1,对白g1进行了菌株鉴定、发酵条件优化、拮抗机理以及盆栽防治效果测定等方面的研究。根据菌落形态、细菌的生理生化特性测定、16SrDNA分子鉴定的结果,初步鉴定拮抗细菌白g1为类芽孢杆菌属(Paenibacillus sp)。通过单因子和正交试验手段,完成白g1产生抑菌活性物质的最佳发酵条件测定。试验结果表明,最佳发酵条件为接种量2%、牛肉膏0.4%、葡萄糖0.25%、硝酸钠0.25%、pH7.0、温度28℃、摇床150rpm、发酵时间72h。菌株白g1(Paenibacillus sp)与无菌发酵液对香蕉枯萎病菌的菌丝和分生孢子都有很好的抑制作用。使香蕉枯萎病菌菌丝消解,断裂,局部突出畸形,末端膨大,原生质外流;分生孢子质壁分离、原生质浓缩、萌发率降低。管碟法测定无菌发酵滤液的抑菌活性,抑菌圈达到21.3mm,10倍无菌发酵滤液的稀释液对孢子的抑制萌发率为94.4%。拮抗菌株白g1的抑菌活性物质对温度、酸、碱均具有较好的稳定性,无菌滤液在121℃灭菌10min的抑菌圈可以维持在15.0mm,pH2~pH9时都有较好的稳定性,存放55天的抑菌圈达到19.1mm。60%的饱和硫酸铵溶液沉淀法可以有效提取抑菌活性物质。白g1(Paenibacillus sp)的抑菌活性物质为蛋白质类物质,抗菌粗提物中起拮抗作用的蛋白质分子量约为29.0KD、33.5KD两种,对蛋白酶K、胃蛋白酶、胰蛋白酶等三种酶非常敏感。盆栽试验采用伤根接种对香蕉苗进行8个处理,结果表明:拮抗菌白g1菌悬液的浓度为2.0×10~6 cfu/ml,对香蕉枯萎病的生防效果达到81.5%。白g1对香蕉枯萎病能达到减轻病情、提高植株抗病力、促进蕉苗生长的作用,表现出良好的应用前景。
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