论文部分内容阅读
目的:大肠癌是常见的恶性肿瘤,据全球的疾病发展评估资料显示呈逐年上升趋势。大肠癌的发生是多步骤、多基因、多因素综合作用的复杂过程,细胞异常增殖和细胞凋亡调控失调,可导致细胞恶变致肿瘤发生。Bag-1是Bcl-2结合抗凋亡基因1,可与多种细胞因子结合抑制细胞凋亡,可与Bcl-2蛋白形成复合物抑制细胞凋亡。研究发现Bag-1在许多肿瘤如乳腺癌、胃癌、肺癌等高表达,提示Bag-1可能通过抑制细胞凋亡而促进肿瘤的发生。Caspase-3是促凋亡蛋白,能够降解多种底物,导致细胞骨架断裂崩解,是细胞凋亡信号通路下游最主要的执行分子之一,在细胞凋亡中起关键作用。研究发现Caspase-3参与多种肿瘤的发生发展。本实验拟采用免疫组织化学方法,检测正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤和大肠癌组织中抗凋亡蛋白Bag-1和促凋亡蛋白Caspase-3表达情况及相关性,同时探讨二者与大肠癌临床病理特征的关系,为临床大肠癌早期诊治提供理论参考依据。 方法:本实验选取2010年3月至2011年5月期间住院行大肠癌手术患者60例,大肠腺瘤患者50例,以20例正常大肠粘膜标本作为对照。选用免疫组织化学染色法检测各组病例Caspase-3蛋白和Bag-1蛋白表达情况,分析大肠癌患者Bag-1和Caspase-3与临床病理特征的关系。兔抗人单克隆抗体Bag-1、兔抗人单克隆抗体Caspase-3、SABC免疫试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。抗Bag-1浓度1:50,Caspase-3和SABC试剂的工作浓度均为1:75。参照SABC说明书进行。统计学分析采用SPSS13.0软件,各组间比较应用χ2检验P<0.05有统计学意义。 结果:⑴Bag-1蛋白的表达情况:Bag-1蛋白阳性染色为淡黄至棕黄色颗粒,主要位于细胞浆,少数位于细胞胞核。正常大肠黏膜组织Bag-1蛋白阳性表达率明显低于大肠腺瘤、大肠癌,分别为10.00%(2/20)、72.00%(36/50)、66.67%(40/60),差异有统计学意义(p<0.05);Bag-1蛋白阳性表达率与肿瘤分化程度有关,高分化组明显低于中、低分化组,差异有统计学意义(p<0.05),分别为30.43%(7/23)、81.81%(18/22)、86.67%(13/15);Bag-1蛋白阳性表达率与淋巴转移有关(p<0.05),大肠癌有淋巴结转移组Bag-1阳性表达率高于无淋巴结转移组,分别为92.31%(24/26)和67.65%(26/34),且差异具有统计学意义(P<0.05)。Bag-1蛋白阳性表达率与患者性别、年龄、浸润深度、肿瘤大小、Dukes分期病理学特征无关(p>0.05)。⑵Caspase-3蛋白的表达情况:Caspase-3蛋白染色定位于细胞浆为淡黄至棕黄色颗粒。在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤和大肠癌中表达依次降低,差异有统计学意义(p<0.05),Caspase-3蛋白阳性表达率分别为85.00%(17/20)、58.00%(29/50)、35.00%(21/60)。Caspase-3蛋白阳性表达率与肿瘤浸润深度有关(p<0.05),浸润深度在粘膜及粘膜下层阳性表达率为76.47%(13/17),浸润深度在肌层及浆膜层阳性表达率为32.56%(14/43)。Caspase-3蛋白阳性表达率与淋巴转移有关,无淋巴结转移组Caspase-3蛋白阳性表达率高于有转移组(p<0.05),分别15.38%(4/26)和64.71%(22/34)。Caspase-3蛋白阳性表达率与性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、Dukes分期等病理学特征无关(p>0.05)。⑶60例大肠癌组织中Bag-1蛋白与Caspase-3蛋白的表达呈负相关(r=0.475,p<0.05)。 结论:①大肠腺瘤和大肠癌组织中Bag-1蛋白阳性表达率明显高于正常大肠粘膜,且Bag-1蛋白阳性表达率与大肠癌肿瘤分化程度及有无淋巴转移有关,提示Bag-1可能在大肠腺瘤形成及大肠癌发生发展中起一定作用。②Caspase-3蛋白在正常大肠黏膜、大肠腺瘤和大肠癌组织中阳性表达率逐渐降低,同时Caspase-3阳性表达率与肿瘤浸润深度和有无淋巴转移有关,提示Caspase-3可能在大肠癌发生发展中起一定作用。③大肠癌组织中Bag-1与Caspase-3蛋白表达呈负相关。