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目的: 艾滋病是一种严重影响人类健康的慢性传染病,随着高效抗反转录病毒治疗(Highly Active Anti-Retroviral Therapy,HAART)的广泛应用,艾滋病病死率显著下降,HIV感染者生存期明显延长,但HIV感染者的慢性并发症尤其是骨密度(Bone Mineral Density, BMD)降低越来越常见。BMD降低会增加骨折的风险,严重影响HIV感染者的生活质量并增加了患者与社会的经济负担。HIV感染者的骨密度情况逐渐引起临床医生的重视并成为国际研究的热点。 骨密度降低包括骨量减少和骨质疏松,通常先发生骨量减少,严重者发生骨质疏松,进而增加了骨折的风险。HIV感染是否会引起骨密度降低目前尚存争议,国外研究报道HIV感染者骨密度降低的发生率高于健康人群。但荷兰对高加索人的研究表明HIV感染与骨密度降低无统计学关联性。不同感染时间对HIV感染者骨密度的影响也存在争议。荷兰学者Marlous等人发现在HIV感染早期就会出现骨密度降低,但其他研究认为骨密度降低与感染分期无关。另外,影响HIV感染者骨密度的危险因素尚不明确。除常见的危险因素如高龄、女性、低体重指数(BodyMass Index,BMI)外,其他因素如传播途径、感染分期、CD4计数、病毒载量水平可能也会影响HIV感染者的骨密度。 我国尚缺乏HIV感染及不同感染时间对骨密度影响的研究,对HIV感染者发生骨密度降低的危险因素的研究也较少。本研究分析了我国HIV急性期感染者、慢性期感染者及健康人群骨密度降低的发生情况及HIV感染者骨密度降低的危险因素,有助于早期发现和治疗HIV感染者骨疾病,降低骨质疏松和骨折的发病率,提高HIV感染者的生活质量。 方法: 一、研究对象 (一)急性期HIV感染组21例 1、入选标准:HIV抗体阴性或不确定且HIV RNA大于10000 copies/ml或入选时HIV抗体阳性且6个月内有明确的HIV抗体阴性证据;受试者在此之前没有接受过任何抗反转录病毒治疗;自愿签署患者知情同意书并接受骨密度检测;年龄18-70岁;中国国籍。 2、排除标准:合并有严重的呼吸衰竭,慢性酒精中毒,恶病质状态,肾衰,心衰(纽约分级Ⅲ或Ⅳ级),甲状腺疾病,性腺疾病;妊娠哺乳期的患者;合并使用糖皮质激素,生长激素,免疫抑制剂,化疗药物,抗癫痫药,双磷酸盐药物者。 (二)慢性期HIV感染组71例: 1、入选标准:由艾滋病确认实验室经Western blot试验确认HIV抗体阳性;受试者在此之前没有接受过任何抗反转录病毒治疗;自愿签署患者知情同意书并接受骨密度检测;年龄18-70岁;中国国籍。 2、排除标准:HIV急性期感染者;合并有严重的呼吸衰竭,慢性酒精中毒,恶病质状态,肾衰,心衰(纽约分级Ⅲ或Ⅳ级),甲状腺疾病,性腺疾病,合并使用糖皮质激素,生长激素,免疫抑制剂,化疗药物,抗癫痫药,双磷酸盐药物者。 (三)健康对照组145例: 1、入选标准:中国医科大学附属第一医院体检中心常规体检的健康人,其性别比例与年龄构成与HIV感染组相同。 2、排除标准:同急性期HIV感染组的排除标准。 二、实验方法 (一)实验室检测 1、样本采集:无菌采集研究对象静脉全血15ml,装于1个EDTA抗凝管10ml和1个非抗凝管5ml 2、HIV抗体筛查试验:采用雅培贸易有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定试剂盒(化学发光微粒子免疫检测法)测定。 3、HIV抗体确认试验:采用MP生物医学亚太私人有限公司的人类免疫缺陷病毒(HIV1+2型)抗体免疫印记试剂盒测定。 4、CD4细胞绝对计数:绝对计数管中加入20ul CD4/CD8/CD3TriTEST试剂和50ul待测抗凝全血,在室温下避光染色15分钟,然后加入BD免沈溶血素450ul,在室温下避光溶血15分钟,再用FACSCalibur流式细胞仪中的MultiSET软件进行检测并自动分析,获得CD4细胞数量的绝对值。 5、病毒载量检测:采用Roche公司COBAS(@) AMPLIPrep/COBAS(@) TaqMan(@)HIV-1Test,Version2.0试剂盒在COBAS(@) TaqMan(@)系统进行检测,检测下限为20 copies/ml。 6、骨密度检测:采用双能x线骨密度吸收仪测量腰椎、双侧髋部的骨密度-T值和Z值。 (二)诊断标准 根据世界卫生组织的诊断标准,正常骨密度指骨密度T值≥-1;当T值<-1时统称为骨密度降低,其中骨量减少指-2.5<T值<-1,骨质疏松指T值≤-2.5;合并有骨折的骨质疏松可定义为严重骨质疏松11。 三、统计分析 实验室检测数据采用Epidata3.1软件进行双录入,进行一致性检验和逻辑检错。采用SPSS18.0进行统计分析。计量数据满足正态分布采用均数±标准差((x)±s)表示,不满足正态分布用中位数(四分位数)表示。计数资料和连续性变量分别采用x2检验和t检验。多因素分析采用Logistic回归分析,p<0.05为差异有统计学意义。 结果: 一、研究对象的基本特征: 共入选92例HIV感染者和145例健康人,分为急性期感染者组21例,慢性期感染者组71例和健康对照组145例。研究对象的年龄范围是20岁至75岁。慢性期感染组的体重和体重指数均低于健康对照组(66.2 VS73.6,22.0 VS27.1,p=0.001)。急性期感染组的估计感染时间为43.5(27.5-84.2)天,明显早于慢性期感染者组842.0(461.0-1654.3)天。急性期感染组的CD4计数为420±152个/μl,病毒载量水平是5.3±1.3 log10 copies/μl,慢性期感染组的CD4计数为286±168个/μl,病毒载量水平是2.7±1.8 log10 copies/μl,急性期感染组的CD4计数和病毒载量水平均显著高于慢性期感染组(p=0.000)。两组在性别、年龄、身高、吸烟、饮酒、传播途径上无统计学差异。 二、三组研究对象的骨密度比较: HIV感染者中有76例患者接受双侧髋关节和腰椎骨密度检测,其余16例患者只检测了腰椎骨密度。健康对照组145例均接受了双侧髋关节和腰椎骨密度检测。对两组人群各个部位的骨密度值进行独立样本T检验,结果显示慢性期感染组的右侧股骨、右侧股骨颈的骨密度值明显小于健康对照组(0.94 VS0.99,t=-2.555,p=0.011;0.86 VS0.93,t=-2.576,p=0.011);慢性期感染组的左侧股骨、左侧wards区的骨密度值均小于健康对照组(0.93 VS0.98,t=-2.252,p=0.025;0.68 VS0.72,t=-2.121,p=0.036),慢性期感染组的左侧股骨的骨密度值小于急性期感染组(0.93VS0.99,t=-2.047,p=0.043)。三组双侧大转子和粗隆间的骨密度差异没有统计学意义。 对三组样本腰椎密度的分析结果表明慢性期感染组第四腰椎的密度低于健康对照组(0.99 VS1.03,t=-2.092,p=0.037),急性期感染组和慢性期感染组各个椎体骨密度值比较均无统计学差异。 三、三组人群骨量减少与骨质疏松的发生率比较: 根据三组研究对象检测的腰椎T值来评价其骨密度降低、骨量减少与骨质疏松的发生情况,发现急性期感染者中有4人(19.0%)发生骨量减少。慢性期感染组中共有19人(26.7%)发生骨密度降低,其中16人(22.5%)发生骨量减少,3人(4.2%)发生骨质疏松。健康对照组中骨密度降低的发生率为15.3%,骨量减少和骨质疏松的发生率分别是13.7%和1.6%。慢性期感染组腰椎骨密度降低的发生率显著高于健康对照组(p=0.035),骨量较少或骨质疏松的发生情况三组无统计学差异。 根据双侧髋关节T值来评价骨量减少或骨质疏松的发生情况,三组无统计学差异。 四、HIV感染者骨密度降低的危险因素分析: 根据腰椎T值将92例感染者分为骨密度正常组和骨密度降低组,将可能与骨密度降低的变量分别进行单因素Logistic回归分析,结果显示骨密度降低与年龄、BMI、传播途径存在显著的统计学关联性(p<0.05),而与性别、感染分期、是否吸烟喝酒、CD4计数水平均无统计学关联性(p>0.05)。将p<0.1的变量纳入多因素Logistic回归模型,分析各变量与骨密度降低发生的相关性,结果显示年龄≥60岁(vs.20-39岁)(aOR,5.085;95%CI,1.414-18.280; p=0.013)、BMI<20 kg/m2(vs.≥20 kg/m2)(aOR,5.553;95%CI,2.168-14.218; p=0.000)、HIV传播途径为MSM(vs.非MSM途径)(aOR,2.291;95%CI,1.134-4.435; p=0.004)是骨密度降低的独立危险因素。 结论: 1、慢性期感染者骨密度值明显低于健康人群; 2、急性期感染者未发生明显骨密度降低; 3、年龄≥60岁、BMI<20 kg/m2、MSM途径是HIV感染者骨密度降低的独立危险因素。