金钗石斛生物总碱对LPS诱导的大鼠海马tau蛋白异常磷酸化的影响

• 作 者: 杨姝
• 机 构: 遵义医学院
• 出 处: 遵义医学院
• 发表日期: 2010年期
• 关键词: 金钗石斛生物总碱 脂多糖 tau蛋白 磷酸化 细胞凋亡

目的：观察金钗石斛生物总碱（Dendrobium nobile Lindl.alkaloids，DNLA）对双侧脑室注射脂多糖诱导的大鼠海马tau蛋白异常磷酸化的影响，并探索其作用机制。　　
方法：40只健康SD大鼠随机分为5组（n=8）：假手术组、正常给药组、模型组、DNLA低剂量组和DNLA高剂量组。制模前一天分别予DNLA20 mg/kg/8 h、40 mg/kg/8 h灌胃给药，正常给药组予以DNLA40 mg/kg/8 h，假手术组与模型组分别给予等体积的蒸馏水。制模当天给药1 h后，通过双侧侧脑室注射脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导大鼠脑神经炎症模型。LPS注射2 h后，每组取3只大鼠，采用免疫印迹法（Western blotting）检测大鼠海马tau蛋白的磷酸化位点Ser396、Serl99-202、Ser404、Thr231和Thr205的磷酸化水平和GSK-3β蛋白的表达；每组其余5只术后一周取材，期间照前灌胃给药或蒸馏水。采用原位末端标记（TUNEL法）观察LPS诱导的大鼠海马神经元凋亡情况及DNLA可能的干预作用。　　
结果：与假手术组比较，正常给药未影响大鼠海马tau蛋白的相关磷酸化位点和GSK-3β蛋白的表达，然而，模型组大鼠海马tau蛋白在位点Ser396、Ser199-202、Ser404、Thr231、thr205的磷酸化水平和GSK-3β的蛋白表达均显著增高；与模型组比较，DNLA低、高剂量（20 mg/kg/8 h、40 mg/kg/8 h）组，可以明显降低大鼠海马tau蛋白在位点Ser396、Ser199-202、Ser404、Thr231、Thr205的磷酸化水平和GSK-3β的蛋白表达。与此相似，在海马周围区域，假手术组大鼠很少见到其神经元凋亡，正常给药没有影响大鼠海马神经元凋亡，然而，模型组凋亡细胞数量明显多于假手术组。与模型组比较，DNLA组大鼠海马周围区域细胞凋亡程度明显减弱，细胞凋亡数量显著减少。　　
结论：DNLA可以减轻LPS诱导的大鼠海马tau蛋白异常磷酸化，并阻遏大鼠海马周围的细胞凋亡。