【摘 要】
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鸡的品种改良具有十分重要的生产意义。鸡解偶联蛋白基因是影响鸡生产性状的重要基因，它所编码的解偶联蛋白(uncoupling proteins，UCP)的主要功能是使呼吸链氧化过程与ADP磷酸
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鸡的品种改良具有十分重要的生产意义。鸡解偶联蛋白基因是影响鸡生产性状的重要基因，它所编码的解偶联蛋白(uncoupling proteins，UCP)的主要功能是使呼吸链氧化过程与ADP磷酸化过程脱偶联，使ATP生成减少，能量消耗和产热增多，体重下降。UCP基因表达下调会使ATP合成增多，促进合成代谢。本文利用RNA干扰技术和转基因技术相结合，试图从根本上调节肉鸡体内IJCP基因的表达水平，改变其能量代谢与转化过程，实现提高能量代谢效率，增加体重之目的。
根据已报道的鸡UCP基因序列，设计筛选了4条特异性抑制其表达的siRNAs基因，通过化学合成方法合成后，将它们分别克隆到siRNA表达载体psiSTRlKE-U6中，经酶切和序列测定等方法鉴定，证实已成功构建了4个不同的针对鸡UCP的siRNA表达载体：1号质粒，2号质粒，3号质粒，4号质粒。以石歧黄鸡为实验动物，利用卵巢直接注射转基因方法将上述载体分别导入性成熟鸡的卵巢中，每个表达载体注射7只母鸡。正常受精产卵后，人工孵化共获得G1代仔鸡151只。通过PCR特异性扩增检测目的基因的整合，结果共有63只为转基因阳性，整合阳性率为41.6％。随机选择8只转基因鸡，以鸡3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因为内参，利用实时荧光定量PCR技术检测其体内UCP基因的表达水平。结果显示，与正常鸡相比，实验鸡体内UCPmRNA的表达水平下降了约90％。
本实验成功的制备了体内UCP基因表达水平下降的转基因鸡，给研究UCP对鸡体能量代谢的影响提供了动物模型，也为得到饲料消耗少，增重速度快的品种改良鸡打下了基础。
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