鸡Edg受体家族基因的克隆及其在胚胎发育早期中的表达分析

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Edg(endothelial differentiation gene)受体家族属于G蛋白偶联受体亚家族,介导S1P(磷脂酸鞘氨醇,sphingosine-1-phosphate)和LPA(溶血磷脂酸,sysophosphatidic acid)信号,参与细胞增殖、迁移、分化、细胞骨架重组和细胞凋亡等细胞活动调节,在血管及神经发育、生殖、移植、免疫、损伤修复、肿瘤和自身免疫性疾病等生理病理过程中发挥作用。目前在人和小鼠中已发现八个Edg受体家族成员,根据它们结合的配体分子分为S1P亚家族(S1p1/Edg1、S1p2/Edg5/H218/AGR16、S1p3/Edg3、S1p4/Edg6和S1p5/Edg8)和LPA亚家族(Lpa1/Edg2/VZG-1、Lpa2/Edg4和Lpa3/Edg7)。虽然被命名为血管内皮分化基因,但除在小鼠中己证实S1p1参与血管发育调节外,此家族其它成员在血管系统中的具体作用并不清楚,它们在小鼠以外物种中的研究更缺乏资料。为了进一步探讨Edg受体家族的生物学功能,我们采用鸡为研究模型。鸡具有取材容易,便于观察和操作,实验周期短,经济实费等优点。我们用电子克隆的方法推导出了鸡中Edg受体家族六个成员(S1p1、S1p3、S1p、Lpa1、Lpa2和Lpa3)包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)的cDNA序列,并从五日龄鸡胚中扩增出了所有推导出的cDNA序列。用原位杂交的方法分析Edg受体家族成员在鸡胚发育中的表达情况,我们的结果显示:在鸡胚发育中,S1p1、S1p3和Lpa1具有限制性的表达模式,S1p4、Lpa2和Lpa3的表达微弱或广泛表达;发育中的血管、心脏、脑、鳃弓、体节、眼、肢芽等组织器官表达多个Edg受体家族成员;和小鼠比较,Edg受体家族在鸡和小鼠胚胎发育中存在一定的表达差异。本课题研究结果为以鸡为模型,研究Edg受体家族的功能和进一步比较它们在不同物种中的功能特点提供了积极数据。
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