应用盐溶蛋白SDS-PAGE技术鉴定杂交水稻种子纯度的研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 9次 | 上传用户:oldfly2005
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水稻是我国第一大粮食作物,在我国的种植结构中占有极其重要的地位。特别是最近几年,杂交水稻在我国得到了大面积的推广种植,加强种子纯度检测,严格控制流通过程中杂交水稻种子质量,对水稻生产至关重要。本研究旨在建立一种快速、准确的水稻种子纯度检测技术,为水稻种子质量控制提供依据。本研究应用SDS-PAGE技术对福建省目前播种面积较大的4个杂交组合及其三系以及9个不同的杂交种F1进行了分析比较,选择了一种快速、简便、经济的纯度鉴定方法同时建立了其标准参照程序,并对几份杂交水稻进行了纯度分析,探讨其在生产上的实用性及应用前景。主要研究结果如下:1、对3个杂交组合及其三系种子的盐溶蛋白进行了SDS-PAGE分析。结果显示:盐溶蛋白的多态性丰富,三系及F1种子的谱带类型基本相同,但彼此间在特征谱带的数目、宽窄、颜色深浅均有明显差异。可以把杂交组合及其三系互相区分开来。可见种子盐溶蛋白的分辨率较高,特征带明显,可以用于杂交稻种子纯度的鉴定。同时对8个不同的杂交水稻组合及同一杂交水稻组合的T优551、金两优36在不同种植区的种子进行了SDS-PAGE分析,结果表明:不同的杂交稻组合蛋白质谱带清晰,各组合间在谱带数目、位置分布和带的强弱等特点均有较明显的差异,可将不同杂交稻组合的差异显示出来;同一批种子在不同地区、不同年份种植所获种子的蛋白谱带相同,不受种植区域、地力水平的影响。将杂交种F1代金两优36均分成两份,其中一份在海南进行田间小区种植鉴定,纯度分别为97.6%、95.2%;另一份随机抽取100粒单种子进行电泳检测,纯度分别为97%、95%,二者所得结果基本一致,说明利用此技术鉴定水稻品种纯度是可靠的,准确的。多次反复的试验表明SOS—PAGE技术是一种简便、快速、可靠、成本低的方法,值得在品种真实性和种子纯度鉴定上推广应用。2、对4个杂交组合及其三系的萌动期种子进行了SDS-PAGE分析。结果表明:萌动期种子盐溶蛋白多态性较强,不同杂交组合及其三系间谱带差异明显,可将同一杂交组合及其三系以及不同杂交组合及其三系区分开来。不过,相比较干种子,萌动期种子在条件控制、材料选择上都有局限性。并且,杂交稻干种子盐溶蛋白较之萌动期种子盐溶蛋白具有更高的多态性,所以本研究认为杂交水稻干种子盐溶蛋白更适用于纯度检测。杂交稻萌动期种子作为一种补充方法,亦可以在实践中应用。
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