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目的:Superfect是一种新型的纳米转染载体,其转染效率主要与DNA的剂量、N/P比(N:载体分子表面胺基的数量,P:DNA中磷酸基团的数量)、细胞类型和密度、细胞融汇(cell confluency)程度及载体与DNA形成的复合物与细胞共同孵育的时间等因素相关.该实验对其转染效率、最佳转染条件和细胞毒性进行初步的研究,探讨其在基因治疗领域的应用价值.方法:以50﹪融汇率的小鼠黑色素瘤细胞为靶细胞,以增强绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1为导入基因.实验组:以不同的转染条件转染,即不同的质粒剂量(0.25ug,0.50ug)、不同的N/P比(2:1,5:1,10:1)及复合物与细胞的孵育时间(3h,6h);对照组:分为裸质粒转染组、载体转染组,非转染组.流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测细胞毒性.结果:各实验组间的转染效率有显著性差异(P<0.05),Superfect在高N/P比及长时间与细胞孵育时表现出一定的细胞毒性.当质粒剂量为0.5ug,N/P比为5:1,复合物与细胞孵育3h时,Superfect具有较高的转染活性,并表现出较低的细胞毒性(P<0.05),而且在6天的观察时间内,荧光蛋白的表达量在转染后有随时间推移而逐渐增加的趋势.结论:Superfect是一种高效低毒的转染载体,其最佳转染条件和对细胞活性的影响主要与N/P比及复合物与细胞的孵育时间相关.荧光蛋白的持续表达提示其可以介导DNA稳定转染.Superfect在基因治疗领域将具有良好的应用前景.