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论文包括以下几个部分:第一章概述了雌激素分析方法研究的进展,重点讨论了色谱法、免疫分析法和生物传感器技术在测定雌激素方面的应用,展望了雌激素分析的发展方向.同时,总结雌激素的分泌、生理作用以及相关疾病的研究状况.并在此基础上提出了利用雌激素-生物素标记物进行免疫分析测定雌激素,提高分析的灵敏度和准确性的可能性.第二章复苏雌激素单克隆抗体杂交瘤细胞株,并通过动物体诱生的方法制备三种雌激素单克隆抗体,并对抗体的特异性和亲和常数进行了表征.设计并合成了雌激素-生物素标记物,并对标记物合成中空间位阻效应进行了研究,获得最适合雌激素免疫分析的雌激素-生物素标记物.并合成了异硫氰基荧光素标记的链转亲和素探针,标记率约为7.5.第三章通过比较两种酶免疫分析方法,确定以雌激素-生物素标记物为示踪剂的酶免疫分析法具有更高的灵敏度和更大的检测范围.结合生物素-亲和素放大体系,建立了酶免疫分析法测定雌激素的方法,通过与化学发光免疫分析法比较证明酶免疫分析法具有很高的灵敏度和特异性.三种雌激素的测定结果分别为E<,1>:线性范围:50-5000 pg/mL,检测限:37 pg/mL,回收率:88-104﹪;E<,2>:线性范围:20-10000 pg/mL,检测限:12 pg/mL,回收率:88-107﹪;E<,3>:线性范围:100-10000pg/mL,检测限:60 pg/mL,回收率:88-109﹪第四章在充分研究抗体—水凝胶复合物的合成方法,对抗体的固定化效率和抗体活性保留的影响的基础上,结合异硫氰基荧光素标记链转亲和素探针,建立了一种新型的温控相分离免疫分析方法,并利用此方法分析了血清中的雌二醇和雌三醇.此方法与酶免疫分析法相比,分析时间由5 h缩短至2 h,且没有非特异性吸附的影响.与原来的温控相分离免疫分析方法相比,灵敏度提高了1-2个数量级.结果为E<,2>:线性范围:20-3300 pg/mL,检测限:10 pg/mL,回收率:91-96﹪;E<,3>:线性范围:250-30000 pg/mL,检测限:70 pg/mL,回收率:88-108﹪第五章对以CTTA-Eu<3+>为探针的多重标记的链转亲和素-牛甲状腺球蛋白复合物(SA-bTG-(CTTA)<,n>-Eu<3+>)的荧光性质进行了研究.研究表明探针与Eu3+反应时间为50 min,SA-bTG-(CTTA)<,n>-Eu<3+>在0.2-20 μ g/mL范围内,浓度与荧光强度成正比.建立了以水凝胶为载体的测定雌二醇的均相时间分辨免疫分析方法,该方法在很大的浓度范围内荧光强度和浓度的负对数成正比,且分析结果具有高的精确度.实验结果为:线性范围:50-3200 pg/mL,检测限:35 pg/mL,回收率:91-102﹪.第六章在充分总结实验结果的基础上,通过以质量作用定律为基础的理论推导,并利用计算模拟,研究了标记半抗原竞争免疫分析法的灵敏度和检测范围的影响因素.对建立更灵敏的竞争免疫分析方法提出了优化建议.第七章总结论文工作,对未来工作进行展望.