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猪流行性腹泻(Porcine Epidemic Diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)引起的猪的一种急性、高度接触性肠道传染病。不同品系、不同年龄阶段的猪均易感染。疫苗免疫可以有效预防经典毒株,但是自2010年12月以来,PEDV变异毒株引起以新生仔猪严重呕吐、水样腹泻和高病死率为主要临床特征的“顽固性腹泻”,发病率和死亡率显著提高。这表明PEDV毒株在进化过程中出现了变异,传统疫苗株已经无法提供有效的交叉免疫保护,因此有必要通过PEDV流行病学调查,优化免疫程序,有效的治疗手段,以降低变异毒株感染所造成的经济损失。本研究针对江苏某农场所属的集约化猪场防控PEDV感染的实际需求,进行了流行病学监测、免疫程序和治疗方案优化,并在全场范围内进行了新方案的集成和推广应用,取得了良好效果。1猪流行性腹泻病毒流行病学分析与免疫程序优化1.1农场区域PED流行病学调查调查统计2012-2017年间PED在农场区域内的7个场的发生的疫情及发病季节,总结出PED的流行季节性特点不明显,结合发病次数分析疫情情况,总结后期疫情得到控制的主要原因包括:(1)在流行情况较严重的年份使用了返饲作为控制疫情的重要手段;(2)使用与流行毒株同源性较高的疫苗株;(3)防控重点从冬季转为四季防控;(4)在长时间的治疗中发现益生菌可以有效控制病毒性腹泻的蔓延。目前鉴于PED的样本检测阳性率下降,PED在高等级的生物安全下总体可控。1.2PEDV流行毒株分析采集2015-2017年间疑似PED病猪样品,经过PCR扩增和克隆测序鉴定,共获得16株PEDV流行株,经过遗传进化分析,所有16条序列均与G2b亚型参考毒株的S基因序列处于相同的进化分支,说明监测猪场中流行的毒株均属于G2b亚型。1.3免疫程序优化选择不同疫苗组合进行了不同免疫程序的保护效果评价,母猪在分娩前不同时间点进行免疫,分娩后收集初乳进行IgA抗体检测。结果显示:不同时间点免疫相同弱毒株的免疫效果差异不显著;相同时间点免疫不同弱毒株的免疫效果差异明显(p<0.05),产前免疫毒株相同但次数不同的差异不明显(p>0.05),其中以使用产前免疫24+10天怀孕母猪免疫程序的初乳IgA抗体水平较高。结合各组母猪分娩后仔猪10天内的感染率,监测结果显示:含变异株疫苗的保护率最高,且产前24+10天使用2次弱毒苗的免疫程序效果更佳。2益生菌对PED发病猪群的辅助治疗效果在猪场选取经猪流行性腹泻快速检测卡检测为PEDV阳性的7-10日龄腹泻仔猪共204头仔猪,分为两组,第一组101头,第二组103头,试验期间仔猪自由采食补液盐和人工乳。试验1组肌肉注射恩诺沙星抗生素治疗,连续处理4d。试验2组使用枯草芽孢杆菌6.7*107CFU口服治疗,连续处理4d,观察3天。结果显示:试验1组的死亡率59.4%,试验2组死亡率30.1%,试验2组的存活率显著高于试验1组;试验2组的治疗后腹泻的治愈率(62.5%)与试验1组(9.7%)相比明显提高,枯草芽孢杆菌制剂处理的试验2组平均末重比试验1组显著提高(P<0.05),可见枯草芽孢杆菌制剂对PEDV感染仔猪具有良好的治疗效果,并且仔猪因腹泻而失重的症状得到显著的改善,提高生产性能,基于试验可以证明枯草芽孢口服治疗仔猪腹泻的可行性。又结合临床使用母子同治对比仔猪单独治疗,结果显示母子同治组治愈时间为3.2天明显低于仔猪单治组3.95天,说明母子同治可以缩短仔猪病程,加快腹泻仔猪康复。