环氧化酶抑制剂对Her-2高表达的人胃癌细胞NCI-N87增殖和凋亡的影响

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目的:1探讨环氧化酶-2(COX-2)抑制剂对体外培养Her-2高表达的人胃癌细胞NCI-N87的抑制增殖及诱导凋亡影响。2初步探讨COX-2抑制剂下调Her-2蛋白表达机制。方法:1常规培养人胃癌细胞NCI-N87。2不同浓度的塞来昔布(celecoxib)作用于人胃癌细胞NCI-N87,应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法测定细胞光密度值(optical density,OD),计算出生长抑制率。研究celecoxib对人胃癌细胞NCI-N87增殖的影响。3采用流式细胞术(flowcytometry, FCM)检测celecoxib对NCI-N87细胞周期分布及凋亡的影响。4采用流式细胞术(flowcytometry, FCM)检测MGC803、NCI-N87细胞的Her-2蛋白的表达情况及celecoxib对NCI-N87细胞Her-2蛋白表达的影响。5采用细胞免疫组化法SP(streptavidin-perosidase)法检测NCI-N87的Her-2蛋白的表达情况及celecoxib对NCI-N87细胞Her-2蛋白表达的影响。结果:1不同浓度的celecoxib(10umol/l、20umol/l、40umol/l、80umol/l、100umol/l)作用NCI-N87细胞24h、48h、72h后可抑制细胞的增殖。在10umol/l-100umol/l浓度范围内随浓度的增加,抑制作用逐渐增强,且随着celecoxib作用时间的延长,抑制作用也逐渐加强。与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。说明celecoxib对NCI-N87细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖关系。2不同浓度的celecoxib(20umol/l、40umol/l、80umol/l)可诱导NCI-N87细胞的凋亡,48小时凋亡率分别为23.69±0.29%、36.32±0.38%、42.40±0.55%。且随着celecoxib浓度的增加,NCI-N87细胞的凋亡率逐渐增加,与对照组相比具有统计学意义(P<0.01)。3不同浓度的celecoxib(20umol/l、40umol/l、80umol/l)作用于NCI-N87细胞48小时后,能使G1期细胞百分数明显上升,S期细胞百分数明显下降,使细胞周期停滞于G1期,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01),塞来昔布对人胃癌细胞NCI-N87G2期细胞百分比无明显影响,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。4不同浓度的celecoxib(20umol/l、40umol/l、80umol/l)作用于NCI-N87细胞48小时后,可以下调Her-2蛋白的表达,且随着浓度的增加下调也增加,与对照组相比具有统计学意义(P<0.01)。结论:1塞来昔布可抑制体外培养的人胃癌细胞NCI-N87细胞增殖,诱导其凋亡,塞来昔布可阻滞人胃癌细胞NCI-N87于G1期。2塞来昔布可下调人胃癌细胞NCI-N87的Her-2蛋白表达。
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