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骨骼肌蛋白质周转受到内分泌激素、营养物和炎症等因素的调节。α-硫辛酸(α-Lipoic acid,ALA)在能量动态平衡中起重要作用。因此,本研究的目的是探究ALA对骨骼肌蛋白质合成的影响,并揭示其潜在的作用机制。为了研究ALA对骨骼肌蛋白质沉积的影响,本试验在细胞水平上,选用C2C12细胞,采用总蛋白/DNA、嘌呤霉素方法、Western Blot、qPCR和免疫细胞化学方法检测C2C12细胞蛋白质沉积及相关通路蛋白的表达水平。在活体水平上,选用体重20 g左右3周龄的雄性昆明小鼠,腹腔注射50 mg/kg的ALA 3 h后,通过Western Blot和PCR方法检测腓肠肌蛋白质沉积相关通路蛋白的表达水平。研究结果表明:(1)在C2C12细胞中,添加25μM的ALA可以显著增加细胞总蛋白/DNA的比值和嘌呤霉素参与的蛋白质合成速度(P<0.05),同时显著提高MHCⅡ、p-Akt、p-mTOR和p-S6的蛋白表达(P<0.05),降低AMPK、Ikkα/β和p-eIF2α的蛋白表达(P<0.05),但对p-4E-BP1的蛋白表达无显著影响(P>0.05)。(2)小鼠腹腔注射50 mg/kg ALA 3 h后,可以显著提高小鼠腓肠肌中MHCⅡ、p-Akt、p-mTOR、p-S6和p-FoxO1的蛋白表达(P<0.05),显著下调腓肠肌中p-eIF2α和p-AMPK的蛋白表达(P<0.05),但对p-4E-BP1的蛋白表达无显著变化(P>0.05)。为了研究ALA对骨骼肌蛋白质沉积的调控机制,本试验在C2C12细胞水平上进行了验证。采用总蛋白/DNA、嘌呤霉素、Western Blot、PCR和免疫共沉淀方法研究其对蛋白质合成及炎症相关信号通路蛋白表达的影响。研究结果表明:(1)25μM ALA分别与500 nM mTOR阻断剂(雷帕霉素)和5μM PI3K阻断剂(LY294002)共处理C2C12细胞后,可以完全显著降低细胞总蛋白/DNA的比值和嘌呤霉素参与的蛋白质合成速度及下游相关蛋白的表达(P<0.05);但25μM ALA与0.5 mM AMPK激动剂(AICAR)共处理C2C12细胞后,对细胞总蛋白/DNA的比值和嘌呤霉素参与的蛋白质合成速度及下游相关蛋白的表达无显著影响(P>0.05)。(2)25μM ALA处理C2C12细胞后,可以显著增加TLR2和MyD88的mRNA表达;干扰TLR2后,可以显著抑制细胞总蛋白/DNA的比值和嘌呤霉素参与的蛋白质合成速度,提高下游相关蛋白的表达(P<0.05);IP结果显示,ALA可以显著增强MyD88与PI3K亚基p85的结合(P<0.05)。综上,ALA促进C2C12细胞蛋白质合成,其可能的调控机制是ALA通过激活TLR2,促进MyD88与PI3K的结合,进而增强Akt/mTOR信号通路转导,最终促进细胞蛋白质合成。