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黄瓜(Cucumis sativus L.)是一类重要的蔬菜作物,在世界上被广泛栽培。随着分子生物学技术的发展,遗传转化技术已成为许多作物品种改良的重要手段。但由于黄瓜组织培养具有很强的基因特异性,所以高频率完整植株的再生还比较困难,因此也影响了这些技术在黄瓜育种中的应用。本课题从基因型、激素及其配比、外植体类型、外植体苗龄、再生芽生根等方面进一步研究黄瓜离体再生的影响因素,建立了完整的黄瓜带柄子叶高效再生体系,主要研究结果如下：1.基因型是黄瓜离体再生能力高低的主要影响因素之一,不同基因型黄瓜品种之间的再生能力差异很大。黄瓜带柄子叶再生体系建立所用的3个品种(津绿3号、绿园8号和新四号)中,以津绿3号和新四号的再生能力较强,在培养基MS+0.5 mg.L-1 6.BA+0.6 mg.L-l IAA上,再生频率和外植体出芽数分别为75%、77%和5.6个、5.2个；而绿园8号的再生频率和外植体出芽数为30%和3.3个。2.植物激素是植物离体再生所必需的,6-BA是黄瓜离体分化中最常用的植物激素之一。本研究所使用的3种基因型的黄瓜在MS+0.5 mg.L-16.BA+0.6 mg.L-1 IAA的培养基上再生频率和外植体出芽数达到最高,因此津绿3号、绿园8号和新四号的最佳芽诱导培养基为MS+0.5 mg.L-1 6.BA+0.6 mg.L-1IAA。3.黄瓜不同外植体的再生能力差异很大,在上述最佳芽诱导培养基上,苗龄为5d的津绿3号、绿园8号和新四号,带柄子叶的分化再生频率为75%、30%、70%,而不带柄子叶、下胚轴不能产生不定芽。所以在本研究中,带柄子叶为再生体系建立的最适外植体。4.苗龄是黄瓜再生频率高低的重要影响因素。试验中在3-7d苗龄的带柄子叶中,津绿3号在5d苗龄时再生频率和外植体出芽数最高,分别为75%和5.6个,而新四号和绿园8号在苗龄为4d时再生频率和外植体出芽数最高,分别为77%、25%和5.2个、4.3个。因此津绿3号最佳苗龄为5d,新四号和绿园8号的最佳苗龄为4d。综上所述,本研究以MS+0.5 mg.L-1 6.BA+0.6 mg.L-1 IAA为芽诱导培养基,津绿3号选用5d苗龄,新四号和绿园8号以4d苗龄,带柄子叶为外植体,采用器官直接发生途径,在较短时间内获得了一定量的再生苗,建立了三种基因型的黄瓜带柄子叶的高效再生体系,为开展黄瓜遗传转化工作奠定了基础。