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目的通过流式细胞仪检测B7H1在多发性硬化患者外周血单个核细胞的表达,并通过免疫荧光染色和流式细胞仪检测B7H1在C3H10细胞移植于多发性硬化的动物模型EAE小鼠中枢神经系统和外周脾脏细胞的表达,探讨B7H1在多发性硬化中的免疫调节作用。方法临床选择2009年9月至2011年2月在苏州大学附属第一医院神经内科门诊与收住院的25例多发性硬化患者为病例组,根据病程分为急性期和稳定期两组,对急性期患者给予激素或硫唑嘌呤等免疫抑制治疗1个月;另选取年龄及性别构成与病例组相匹配的身体健康者20例为正常对照组;通过流式细胞仪检测多发性硬化患者和正常对照者外周血CD4+T细胞和CD14~+单核巨噬细胞的含量及B7H1在这些细胞上的表达。将30只C57BL/6J小鼠随机分为三组:EAE组、细胞移植组和正常对照组;EAE组和细胞移植组小鼠腋下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白加佐剂制备的抗原佐剂乳化物并尾静脉注射百日咳杆菌毒素疫苗,正常对照组小鼠尾静脉注射PBS;通过流式细胞仪检测小鼠胚胎源性间充质干细胞系C3H10T1/2(C3H10)表面B7H1的表达情况,将CSFE荧光标记的C3H10通过尾静脉注射入细胞移植组小鼠体内,并采用荧光显微镜观察其在小鼠体内的迁移情况;观察三组小鼠的发病情况并进行神经功能评分和体重称量;取三组小鼠的脊髓行冰冻切片并进行HE染色和Luxol Fast Blue染色以检测其病理改变;通过免疫荧光染色检测三组小鼠脊髓中B7H1的表达及星形胶质细胞和小胶质细胞的募集情况;通过流式细胞仪检测三组小鼠脾脏中CD4+T细胞和CD14~+单核巨噬细胞的含量及B7H1在这些细胞上的表达。结果1、多发性硬化患者外周血CD4+B7H1~+T细胞和CD14~+B7H1~+单核巨噬细胞表达水平较正常对照者均明显增加,且稳定期比急性期增高;2、激素等免疫抑制治疗可下调多发性硬化患者外周血CD4+B7H1~+T细胞和CD14~+B7H1~+单核巨噬细胞的表达水平;3、EAE组小鼠免疫后逐渐出现体重下降和动作迟缓等EAE症状,脊髓白质可见明显的炎性细胞浸润和髓鞘脱失改变,细胞移植组和正常对照组小鼠无此表现;4、EAE组小鼠脊髓白质B7H1、星形胶质细胞和小胶质细胞以及外周脾脏中CD4+B7H1~+T细胞和CD14~+B7H1~+单核巨噬细胞表达水平较细胞移植组和正常对照组小鼠均明显增加;5、C3H10细胞表面表达B7H1,尾静脉注射入细胞移植组小鼠体内后可迁徙并聚集于小鼠脊髓病灶部位。结论1、B7H1在多发性硬化患者的外周血通过CD4+T细胞和CD14~+单核巨噬细胞发挥负性免疫调节作用。2、免疫抑制治疗可通过影响B7H1的负性免疫调节作用而改善多发性硬化患者的疾病症状。3、B7H1在EAE模型小鼠的中枢神经系统通过星形胶质细胞和小胶质细胞发挥负性免疫调节作用;B7H1在EAE模型小鼠的外周脾脏通过CD4+T细胞和CD14~+单核巨噬细胞发挥负性免疫调节作用。4、C3H10细胞移植可通过影响B7H1的负性免疫调节作用对EAE小鼠起治疗作用。5、B7H1可能可作为MS疾病发生、缓解、严重程度与疗效观察的指标以及MS治疗的靶分子,胚胎间充质干细胞移植也可能可作为多发性硬化治疗的一种新途径。