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目的：人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)先天感染危害巨大，并引起免疫抑制患者致死性感染。其危害主要来自于潜伏病毒在孕期及免疫缺陷等特定时期的再激活。搞清病毒潜伏状态维持及再激活机制并建立有效的病毒再激活控制手段是预防HCMV危害的关键。目前，已经证明HCMV潜伏感染过程中UL138基因处于高表达状态，并与病毒潜伏感染的形成与维持密切相关。UL138基因位于与HCMV病毒致病密切相关的UL/b区，在临床株或低传代分离株中具有潜伏感染特性。在不同细胞环境下，UL138可在活动性感染或潜伏感染时相均可表达。UL138转录本是多顺反子结构，所表达的蛋白有利于病毒的潜伏感染。目前有关pUL138的转录调控已有研究报道，但有关UL138基因具体转录调控机制尚不清楚。本研究对UL138基因的转录调控机制进行了研究，有助于阐明UL138在HELF细胞感染中高表达机制。 方法：采用荧光素酶报告基因表达检测实验及竞争性电泳迁移率变动分析实验(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)筛选鉴定UL138基因上游有启动子活性的核心序列和其相关的转录因子，BAC技术构建调控序列缺失突变株研究启动子活性区的功能并用Northern blot技术检测启动子缺失对UL138基因1.4kb转录本表达的影响，通过Western blot方法检测在HCMV感染的HELF细胞中Ap-1蛋白表达水平的变化，绘制了HCMV Han BAC在转染与该调控序列结合的转录因子Activator protein1(Ap-1) siRNA以及模拟转染空脂质体的HELF细胞和HCMV Han-BAC/△UL138p感染HELF细胞中的病毒生长曲线验证鉴定出的调控序列对病毒复制的影响。 结果：⑴应用pGL3荧光素酶报告载体，采用5端缺失突变技术构建UL138基因5非编码区不同序列的荧光素酶报告载体，确定了一个33bp的正调控元件。构建异源启动子质粒证实调控元件对其具有调控作用，启动子活性。⑵竞争性EMSA实验发现HELF和Thp-1细胞核蛋白中含有正调控序列的特异性结合蛋白，正调控序列区存在转录因子Ap-1的结合位点，并与之特异性结合。⑶BAC技术成功构建UL138基因上游调控序列缺失突变株Han BAC/△UL138p，Northernblot检测出缺失启动子调控序列区及用siRNA干扰转录因子Ap-1后UL138基因1.4kb转录本的表达减少。⑷Western blot结果表明在HCMV感染的HELF细胞中，Ap-1蛋白表达在24小时增加，随感染时间延长，表达水平减少。⑸病毒生长曲线结果显示滴度在接毒后24-72小时3组相比区别不明显。而随着感染时间延长到96小时，HCMV Han-BAC/△UL138p的病毒滴度是Han-BAC的2.5倍，而与转染siRNA of AP-1后感染Han-BAC无明显差异。 结论：①通过荧光素酶报告基因检测技术证实了UL138基因1.4kb转录本上游非编码区的转录活性，确定了一个33bp有启动活性的正调控元件。②通过EMSA证实了正调控序列可与HELF和Thp-1细胞核蛋白特异性相结合，同时存在转录因子Ap-1的结合位点，并与之特异性结合。③缺失调控元件核心序列及干扰Ap-1可影响UL138基因1.4kb转录本的表达。④缺失调控元件核心序列通过抑制UL138基因1.4kb转录本表达可促进病毒复制。