【摘 要】
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目的：设计、筛选并构建针对NF-κB亚基RelA（p65）的小干扰RNA表达载体。方法：通过Invitrogen miRNA设计系统，设计并合成oligos，通过基因重组技术，将合成的双链miRNA oligo插入到miRNA
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目的：设计、筛选并构建针对NF-κB亚基RelA（p65）的小干扰RNA表达载体。方法：通过Invitrogen miRNA设计系统，设计并合成oligos，通过基因重组技术，将合成的双链miRNA oligo插入到miRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFPmiR中，并通过测序进行鉴定，而后通过瞬时转染技术将构建的miRNA表达载体转染至靶细胞Panc I细胞，通过定量PCR明确合成的miRNA表达质粒对胰腺癌Panc I细胞中NF-κB的表达的影响。结果：通过测序，鉴定明确重组克隆中插入片段序列与设计的oligo序列完全一致，干扰载体构建成功，构建载体转染PancI细胞成功，构建载体对PancI细胞中NF-kB沉默效率约为50%左右，能够筛选出有效的miRNA表达质粒。结论：成功设计、筛选并构建针对NF-κB亚基RelA（p65）的小干扰RNA表达载体。并为进一步研究NF-κB在胰腺癌细胞增殖生长中的作用奠定了基础。
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