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研究背景:弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)是一组临床症状、免疫分型、组织形态学及遗传分子学均具有异质性的恶性淋巴组织肿瘤,是最常见的非霍奇金淋巴瘤(non Hodgkin lymphoma,NHL),约占所有NHL的30%～40%。DLBCL的中位发病年龄在60～70岁,大多发生于老年人,但临床上也时有青年或青少年患者。目前临床的标准治疗方案是R-CHOP方案,但仍有30%～40%的患者治疗无效或治疗后迅速复发,疾病进展快,预后差。探究基因在DLBCL发生发展中的作用,有利于发现其致病机制,为DLBCL的临床治疗提供一定理论基础,有助于发展个性化治疗方案。SEL1L(human sel-1 like gene)基因定位于人染色体 14q23.3-q31,由 Biunno及其同事在1997年首次从人基因组中分离,其序列与秀丽隐杆线虫sel-1基因序列相似,近年来大多数研究集中于SEL1L在癌症进展中的作用。目前,SEL1L在多种肿瘤中均有研究。Orlandi等发现SEL1L在117例乳腺癌病例中约2/3低表达,总生存率分析显示SEL1L的表达与预后不良有关。Granelli等在检测35例食管癌病例的SEL1LmRNA和蛋白时显示,在低级别食管癌中低表达,在高级别中高表达,在正常食管鳞上皮中基本不表达,另有5例完全不表达SEL1L且这5例患者的预后最差。SEL1L在淋巴瘤中的表达情况及其意义目前国内外尚未见相关报道。研究目的:探讨SEL1L、BCL2、BCL6在DLBCL中的表达及其意义。研究方法:(1)采用免疫组织化学方法检测123例DLBCL组织中BCL2蛋白、BCL6蛋白、SEL1L蛋白的表达及60例反应性淋巴组织增生(reactive lymphoid hyperplasia,RLH)组织中SEL1L的表达。(2)采用Western Blot法检测BCL2蛋白及SEL1L蛋白在DLBCL细胞株LY-10及SUDHL-4中的表达。(3)设计 3 条 siRNA-SEL1L(siRNA-983、siRNA-1666、siRNA-200)干扰 DLBCL细胞株中SEL1L的表达,并设置阴性对照组(siRNA-NC)及空白对照组(Mock)。(4)应用 lipofectamineTM3000 转染 DLBCL 细胞株 LY-10、SUDHL-4,转染 48 小时后,收集细胞,应用RT-PCR和Western Blot法检测SEL1L mRNA量和SEL1L蛋白量。(5)应用MTT比色法、Transwell小室、流式细胞术检测转染后细胞株的增殖能力、侵袭能力及凋亡情况。(6)Western Blot检测转染siRNA-SEL1L后BCL2的表达量。研究结果:(1)免疫组化显示SEL1L蛋白在DLBCL中的高表达率明显高于RLH中的高表达率(69.9%vs 25.0%,P<0.05),与各临床病理因素均无关。BCL2蛋白在DLBCL中的阳性率是83.7%,与免疫表型、原发位置及AnnArbor分期有关(P<0.05);SEL1L与BCL2蛋白在DLBCL中的表达存在相关性(r=0.227,P<0.05)。BCL6蛋白在DLBCL中的阳性率是61.0%,与免疫表型有关(P<0.05);BCL6与SEL1L在DLBCL中的表达未见明显相关关系(P>0.05)。(2)SEL1L蛋白在DLBCL细胞株LY-10及SUDHL-4中均呈阳性表达。(3)转染3条siRNA-SEL1L后mRNA及蛋白表达量均较阴性对照组、空白对照组显著降低,以siRNA-1666最显著。(4)MTT结果显示,siRNA-SEL1L组较siRNA-NC组和Mock组细胞增殖能力明显下降(P<0.05)。(5)流式细胞术结果表明,siRNA-SEL1L组较siRNA--NC组和Mock组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。(6)Transwell小室实验结果表明,siRNA-SEL1L组较siRNA-NC组和Mock组细胞的侵袭及迁移能力均降低(P<0.05)。(7)siRNA-SEL1L转染后BCL2表达量未见明显改变(P>0.05)。结论:SEL1L在DLBCL组织和细胞株中均高表达;通过siRNA降低SEL1L表达后弥漫大B细胞株LY-10的增殖能力、迁移及侵袭能力降低,细胞凋亡率增加,其具体机制有待深入探究,以期为DLBCL的靶向治疗提供理论依据。