大鼠延髓背角内γ-氨基丁酸和甘氨酸阳性神经元的突触联系

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延髓背角(MDH)或称三叉神经脊束核尾侧亚核(Vc)是接受面口部伤害性刺激信息并将此信息向丘脑、臂旁核等上位中枢传导的中继站,与面口部痛信息的传递有密切关系。γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)和甘氨酸(glycine, Gly)是中枢神经系统内主要的抑制性神经递质。MDH内由GABA能或Gly能抑制性神经元参与形成的镇痛局部环路,在对面口部痛信息传递的调制方面具有重要作用。然而,在形态学方面,对伤害性初级传入纤维与MDH内GABA能和Gly能抑制性神经元以及MDH内向臂旁核(PBN)投射神经元与GABA能和Gly能终末之间的突触联系,尚缺乏系统研究。本论文应用免疫组织化学染色方法和免疫荧光组织化学染色方法,在光镜下对MDH内GABA阳性和Gly阳性神经元的分布、GABA和Gly在MDH神经元内的共存以及GABA和Gly阳性神经元在面口部伤害性刺激时是否表达Fos蛋白等进行了观察。另外,还用包埋前免疫组化和免疫金双标记法以及逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双标记法,在电镜下观察了MDH内传递伤害性刺激信息的P物质(SP)能初级传入纤维与GABA能和Gly能神经元以及GABA能和Gly能终末与MDH内向PBN投射神经元之间的突触联系。一.大鼠延髓背角浅层内SP阳性终末与GABA和Gly阳性神经元间的突触联系 应用免疫荧光组织化学方法对大鼠延髓背角浅层内GABA能及Gly能神经元进行了观察。光镜下可见GABA阳性神经元分布于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层,但主要见于Ⅱ层;Gly阳性神经元在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ层内均有分布,但以Ⅲ层内较为密集;——在 MDH内可见到一些 GABA/Gly共存神经元,共存神经元也主要见于*层。大鼠上唇皮下注射福尔马林导致MDH神经元内C卉S原癌基因的激活并表达FOS蛋白。应用激光扫描共聚焦显微镜观察到部分GABA阳性或Gly阳性神经元呈FOS阳性,GABMOS和 GlyNOS双标神经元主要分布于1层和11层。采用包埋前免疫组化和免疫金技术,在电镜下对sv阳性终末与ona阳性或oly阳性神经元之间的突触联系进行了观察。SP阳性终末与GABA阳性或Gly阳性神经元的胞体或树突形成以非对称性为主的轴-体突触或轴-树突触。二.延髓背角向臂旁核投射神经元与GABA和Gy阳性终末的突触联系 采用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪与免疫组织化学染色相结合的双标记法,在电镜下观察了 MDH内向臂旁外侧核(PBL)投射的神经元与 GABA阳性或Gly阳性终末间的联系。将Hy注入PBL后,HRP逆标神经元主要位于MDH的1层,11层和*层内仅有少量HRP逆标神经元,Ill(逆标神经元主要见于注射区同侧的MDH,对侧MDH内较少见;在MDH的I、11、Ill层神经元的胞体、纤维及终末内可见GABA或Gly免疫组化染色的阳性反应产物;GABA阳性和 Gly阳性终末与 H班逆标神经元的胞体和树突主要形成对称性轴-体突触或轴.树突触联系。 以上结果提示:延髓背角浅层内有散在分布的GABA阳性和Gly阳性胞体、纤维及终末,且GABA和Gly共存于MDH中的部分神经元;将福尔马林注入面口部的皮下后,MDH内的部分 GABA阳性或 Gly阳性神经元表达伤害性刺激诱导产生的FOS蛋白;GABA能和Gly能神经元从SP能初级传入终末直接接受外周的伤害性信息;GABA阳性或Gly阳性终末与延髓背角浅层向臂旁外侧核投射的神经元形成突触联系,说明它们可能受 GABA能和 Gly能抑制性神经元的支配。
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