葡萄高效再生体系的建立研究

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenbenxia
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采用不同培养基、不同种类、不同浓度的细胞分裂素与生长素组合,对19个葡萄品种或株系的叶片、叶柄、茎段及根段进行了组织培养研究,取得的主要结果如下: 1、葡萄外植体无菌系建立:去除顶芽后的葡萄新梢第1~3节为适宜的外植体材料。在不适宜取材的夏秋冬季,采用二次间歇式消毒能有效抑制外植体的污染,降低褐变率。2、胚性愈伤组织与胚状体的诱导:诱导供试多数葡萄离体叶片、茎段、根段外植体脱分化的适宜培养基是NN69+2,4-D 2.0 mg/L+BA 0.2 mg/L,叶柄以NN69+2,4-D 2.0 mg/L + BA 2.0 mg/L为宜。试管苗顶部1~3片叶再生容易,幼叶在多种培养基上能全部愈伤化;而成熟叶片仅自叶脉割伤处与叶柄切口处产生愈伤组织。茎段在切口部位首先产生愈伤组织,茎表皮组织先局部,进而整个茎段愈伤化。供试品种中,无核白、红宝石无核、红光无核、底来特、爱莫无核、无核紫、红无籽露、红葡萄、早玫瑰、黑奥林、红地球、左山1号共12个品种或株系的叶片或叶柄外植体经脱分化形成了胚性愈伤组织及胚状体。多数葡萄品种或株系体细胞胚胎发生的适宜培养基为1/2 B5+BA 5.0 mg/L + IBA 0.1 mg/L。NN69+2,4-D 0.1 mg/L +BA 0.2 mg/L适宜于胚性愈伤组织的保持培养。1/2 B5+BA 0.2 mg/L +CH 100 mg/L 的培养基适宜于胚状体萌发。3、不定芽的诱导:经不定芽途径再生植株的品种分别是无核白、红光无核、红宝石无核、红葡萄、杨格尔、底来特、无核紫、红地球、红无籽露和力扎马特。基因型不同,叶片外植体不定芽再生的适宜培养基不同,如无核白、红宝石无核为1/2 MS+BA 5.0 mg/L +TDZ 0.1 mg/L +IBA 0.05 mg/L,红葡萄为NN69+BA 5.0 mg/L +TDZ 0.2 mg/L,红光无核为1/2 MS+BA 1.0 mg/L +TDZ 0.02 mg/L;无核紫为NN69+BA 1.0 mg/L +TDZ 0.1 mg/L +IBA 0.1 mg/L。同一品种或株系的外植体不同,不定芽再生的适宜培养基也不同,如红宝石无核叶柄再生的适宜培养基为1/2 MS+BA 5.0 mg/L +TDZ 0.1 mg/L +IBA 0.1 mg/L。红宝石无核不定芽发生率最高(36.67%),平均每个外植体产生2.27个不定芽。4、再生植株的生根培养:葡萄不定芽生根的适宜培养基为1/2 MS+IBA 0.1 mg/L。在较强光照条件下(3000 Lx),经1个月驯化培养可使植株健壮,达到移栽条件。
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