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目的:变应性鼻炎(AR)是常见的耳鼻咽喉科疾病,也是常见的呼吸道变应性疾病。变应性鼻炎在全球范围内的患病率为10-25％,而在我国西部的部分地区其患病率高达34.31%,是严重危害人类健康和生活质量的常见疾病。以变应性鼻炎为代表的变应性疾病的发病机制研究一直都是国内外专家关注的热点。一般经典的认识是,变应原桥联IgE,介导肥大细胞脱颗粒释放炎性介质,引起不同程度的鼻黏膜炎症,即I型超敏反应是变应性鼻炎发病的主要机制。但临床上发现,血清中特异性IgE水平与症状严重程度并非完全相关,可能存在非经典途径。近年来,细菌超抗原学说越来越得到广大学者的重视。现有研究证实,细菌超抗原影响免疫调节细胞(T淋巴细胞)和促炎细胞(树突状细胞、嗜酸性粒细胞、上皮细胞等)的活性,诱导或促进变态反应性疾病的发生和发展。
金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)是由金黄色葡萄球菌产生的一种超抗原,能直接连接抗原提呈细胞的MHCⅡ类分子外侧和T细胞受体Vβ区,同时非特异性激活体内将近30%的T细胞,而普通抗原仅能激活0.01%的T细胞。通过SEB超抗原的这种槽外连接,有利于被MHC呈递的抗原肽更有效的与T细胞可变区结合,增强了变应原的抗原性,促进变态反应性炎症的发生、发展。另外,SEB可以作为变应原活化特异性T细胞,继而诱导抗原特异性IgE产生,发生经典的变态反应。金黄色葡萄球菌及其分泌的超抗原广泛分布人类的皮肤和鼻腔,人们在日常生活中接触金葡菌超抗原的频率极高,这就增加了特应性个体罹患变态反应性疾病的风险。但尚无确切证据说明SEB可作为变应原诱导变应性鼻炎的发生。
本研究应用SEB反复鼻腔喷滴,观察豚鼠打喷嚏、抓鼻等变应性鼻炎典型症状,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞的浸润情况,及血清SEB特异性IgE和IgG1的表达,从而证明SEB作为变应原,能够诱导变应性鼻炎的发生。
方法:将20只健康Hartley系豚鼠随机分为2组:模型组和对照组,每组10只。模型组鼻腔喷滴SEB,每天1次,连续14天。每次喷滴前,用4%利多卡因(每侧鼻孔20μ1)先喷滴鼻腔,以抑制鼻腔纤毛运动,延长变应原在鼻腔停留时间。间隔7天后,以同样剂量SEB喷滴鼻腔激发,每周激发2次,连续激发3周。激发前,不再鼻腔应用利多卡因。对照组以生理盐水代替SEB进行实验。在激发阶段,对其喷嚏和抓鼻做动态症状学观察;间接ELISA法检测血清SEB特异性IgE、IgG1和IgG2水平;HE染色观察鼻腔组织的病理改变。
结果:
(1)模型组豚鼠出现典型的变应性鼻炎症状,如频繁喷嚏和抓鼻;模型组豚鼠血清SEB特异性IgE和IgG1滴度明显升高;模型组豚鼠的鼻腔黏膜出现以嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润,黏膜下间质明显水肿,小血管扩张。
(2)对照组豚鼠未出现变应性鼻炎的典型症状,血清中无可检测水平的SEB特异性IgE和IgG1,鼻黏膜未见明显改变。
(3)与对照组比较,模型组豚鼠鼻黏膜相关淋巴组织中IL-23mRNA表达下调,鼻腔灌洗液中IL-17水平降低。
结论:
(1)采用反复鼻腔喷滴SEB的方法诱导出鼻腔黏膜变应性炎症,验证了SEB可以作为传统的变应原诱导变应性鼻炎的发生。
(2)采用反复鼻腔喷滴SEB致敏,鼻腔连续激发的方法诱导出鼻腔变应性炎症,从而成功地建立了具有双相反应的变应性鼻炎动物模型,为进一步研究伴有金葡菌鼻腔携带的变应性鼻炎的发病机制和迟发相反应奠定了基础。
(3)模型组豚鼠Th17型细胞因子IL-23、IL-17的表达降低,而Th2细胞因子IL-4的表达升高,提示变应性鼻炎存在Th2/Th17细胞因子网络失衡,这可能在变应性鼻炎的发病中起着关键的作用。