【摘 要】
：
目的:(1)建立简便、易行的胚胎大鼠NSCs体外分离、培养和扩增的方法。(2)鉴定NSCs及诱导分化后的子代细胞,为NSCs的体内移植研究奠定基础。方法:(1)从胚胎大鼠脑组织中分离NS
论文部分内容阅读
目的:(1)建立简便、易行的胚胎大鼠NSCs体外分离、培养和扩增的方法。(2)鉴定NSCs及诱导分化后的子代细胞,为NSCs的体内移植研究奠定基础。方法:(1)从胚胎大鼠脑组织中分离NSCs,采用神经干细胞克隆悬浮法,选用DMEM/F12培养液,添加无血清培养添加剂b27,细胞生长因子(bFGF和/或EGF)进行体外扩增培养,机械分离连续传代培养,倒置相差显微镜观察细胞形态,细胞生长曲线观察NSCs的增殖能力,并采用免疫荧光细胞化学技术检测NSCs标志物Nestin的表达。(2)观察不同浓度的bFGF、EGF对NSCs增殖的影响,选择最适合NSCs生长的细胞生长因子浓度。(3)以多聚赖氨酸包被盖玻片置于24孔培养板中,将传代培养的NSCs接种于盖玻片上,滴加5%胎牛血清的DMEM/F12培养液,诱导分化培养7天后,用免疫荧光细胞化学技术和免疫细胞化学染色,观察GFAP、β-tubulin-Ⅲ的表达。结果:(1)从胚胎大鼠脑组织分离的细胞在含b27及细胞生长因子bFGF、EGF的无血清DMEM/F12培养液中,能够形成大量悬浮的NSCs克隆球,并可在体外大量扩增和连续传代培养,克隆球经Nestin检测鉴定证实为NSCs。(2)发现不同的细胞生长因子浓度对NSCs的增殖有影响,随着细胞生长因子浓度的增加,NSCs的增殖速度亦随之加快,浓度在20-30ng/ml时细胞增殖速度达到较高水平,因子浓度大于50ng/ml时细胞增殖速度反而下降。(3)胎牛血清共培养7天后,分别做β-tubulin-Ⅲ,GFAP抗体检测,结果显示分化后的细胞部分表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原。
其他文献
我国是一个多民族国家,56个民族共同创造了祖国悠久的历史和灿烂的文化。各民族的服饰饮食、婚丧嫁娶、待客礼仪、节庆游乐、民族工艺、建筑形式等等,都各有特色,形成了我国
随着高等教育体制改革的不断深入,一个由国家、社会、学校和个人合理分担高等教育成本的机制已逐步形成。1994年部分高校开始实行“并轨”制,1997年全部高校实行“并轨”,特
我国的城市化进程进入持续快速发展时期,各级城市都开始重视城乡统筹发展。在经济发达的地区,应该及时制定城乡一体化协调发展战略,积极推进城乡一体化进程。文章在阐述新时
随着我国经济的迅速发展,用电需求也在持续迅猛增长,对高压、特高压输电也提出了新的挑战,对输变电站低压侧管母线的性能要求也越来越高。6063铝合金由于兼具良好的导电性能
绿篱是一种重要的园林表现形式。温度胁迫极大地影响其景观效果及生态效应，甚至直接导致死亡。本文以贵阳市露地生长3年以上的9种常见绿篱植物叶片为试材，模拟自然高、低温处理
以景深扩展和视域扩展为例,介绍了Photoshop CS软件的脚本工具在高质量的金相图片制作上的应用实例,这些应用突破了光学金相显微镜和图像采集设备的物理限制,具有智能和高效
近期，美国和日本分别对其专利法进行了修改，两国均对新颖性宽限期的保护层次进行了重点调整，在此背景下，本文针对世界不同国家和地区的宽限期规定进行了对比分析，并对我国现行的宽
急性肾损伤（acute renal injury,AKI）是新生儿死亡的独立危险因素.目前,临床上有关肾损伤的经典诊断标准为血清肌酐（serum creatinine,SCr）和血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）,已
云南省在2017年引入易班,随着云南省各高校易班发展中心的建立,易班在云南省的发展已具一定规模。发展过程中,遇到的瓶颈也越来越突出,本文以易班粘性为研究对象,浅析了高校
<正>茶叶味道清淡,且富含茶多酚、咖啡碱、脂多糖、多种维生素等,常喝有益身心健康。大部分人泡茶多是将茶叶放进杯中直接用开水冲泡,实际上不同的茶叶冲泡方法是有讲究的,泡