【摘 要】
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目的:探讨ERβ对激素抵抗性前列腺癌细胞株PC-3和PC-3M的增殖和凋亡的影响,为前列腺癌治疗研究提供新的思路与实验依据。方法:以基因重组技术构建pCDNA3.1-hERβ、pEGFP-C1-h
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目的:探讨ERβ对激素抵抗性前列腺癌细胞株PC-3和PC-3M的增殖和凋亡的影响,为前列腺癌治疗研究提供新的思路与实验依据。方法:以基因重组技术构建pCDNA3.1-hERβ、pEGFP-C1-hERβ质粒和pGCsilencerTM U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ质粒;应用真核细胞转染技术转染人前列腺癌细胞株PC3及PC-3M,观察并研究对细胞增殖、凋亡及侵袭能力方面的影响。结果:( 1 )通过酶切鉴定和测序证明pCDNA3.1-hERβ、pEGFP-C1-hERβ和pGCsilencerTM U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ的重组质粒构建成功。(2)将pCDNA3.1-hERβ、pEGFP-C1-hERβ转染前列腺癌细胞PC-3和PC-3M,成功建立了高表达ERβ的细胞株;将pGCsilencerTMU6/Neo/GFP-siRNA-ERβ转染前列腺癌细胞PC-3和PC-3M,成功建立了ERβ沉默的细胞株。(3)生长抑制实验证明pCDNA3.1-hERβ对PC-3和PC-3M细胞增殖具有抑制作用;而转染pGCsilencerTM U6/Neo/GFP-siRNA-ERβ的细胞则无抑制作用。证实ERβ能明显抑制前列腺癌细胞的生长。(4)证实ERβ可诱导PC-3和PC-3M细胞凋亡;同时抑制了细胞增殖相关基因cyclinD1和抑制凋亡基因Bcl-XL、AKt和Survivin的表达;而上调了增殖抑制基因P21和促凋亡基因(caspase3、caspase9等)的表达。(5)基质胶浸润分析实验、酶谱分析实验表明ERβ可使前列腺癌细胞的侵袭力下降。结论:通过增加和降低ERβ在细胞中的表达,发现ERβ可抑制前列腺细胞PC-3和PC-3M的生长,促进其凋亡,降低其浸润特性。
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