苦参碱对人肝癌细胞SMMC-7721的影响及分子机制

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目的1、观察苦参碱对人肝癌细胞SMMC7721的增殖抑制作用;2、探讨Livin、Survivin基因在此凋亡过程中的作用机制。方法采用体外细胞培养技术,以不同浓度苦参碱作用于人肝癌细胞SMMC7721,用MTS比色法观察不同浓度苦参碱对人肝癌细胞SMMC7721增殖的影响,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用RT-PCR检测Livin、Survivin基因的表达水平,Western-blot方法检测Livin、Survivin蛋白的表达水平。结果1.MTS结果显示,不同浓度苦参碱对细胞生长均有一定抑制作用,且同一时间点各组与对照组相比均有显著性差异(P<0.05);2.流式细胞仪检测显示,不同浓度苦参碱处理细胞48h后,与对照组相比,细胞凋亡明显增多,且苦参碱浓度越高,该作用越强;3.PCR及Western-blot结果显示不同浓度苦参碱处理细胞48h后,Livin、Survivin表达减少。结论苦参碱对人肝癌细胞SMMC7721有较强的抑制作用,在一定浓度和时间范围内能诱导SMMC7721细胞的凋亡,Livin、Survivin是重要的凋亡调节基因,参与了苦参碱诱导SMMC7721细胞凋亡的过程。
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