免ghrelin组织分布及其基因克隆的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:f360358188
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
Ghrelin是Kojima等人于1999年在人和小鼠的胃组织中发现的一种多肽,为生长激素促分泌素(Growth hormone secretagogue)受体(GHS-R)天然的内源性配体,能够促进生长激素(GH)释放,故命名为ghrelm。Ghrelin通过其受体发挥作用,具有促进GH分泌,调节能量平衡,刺激胃酸分泌,调节心血管活动,增强免疫应答,抗细胞增值,影响糖代谢,引起焦虑和改善记忆力,调节睡眠,维持睾丸正常功能等多种生物学作用。在人、鼠、羊、猪和鸡等动物有关ghrelin的研究报道较多,但未见有关兔ghrelin基因克隆和分布定位的报道。本文用免疫组织化学和RT-PCR方法开展了这方面的研究,结果如下:   1.用免疫组织化学SP法研究了ghrelin在兔胃肠道内的分布。在胃内,免疫阳性细胞主要位于胃底腺区胃腺的颈部和底部,在贲门腺区和幽门腺区分布较少;在肠道,免疫阳性细胞分布于十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠的粘膜层,在肠腺和肠绒毛上皮分布较多。胃肠道的免疫阳性细胞分为“开放型”和“闭合型”2种,“开放型”细胞呈锥体型,顶部到达腔面;“闭合型”细胞呈圆形或椭圆形,顶部不到达腔面。胃肠道免疫阳性细胞分布密度以胃部最多,从胃到直肠逐渐减少,而“开放型”细胞所占比例沿胃肠道由近及远逐渐升高。   2.用免疫组织化学SP法研究了ghrelin在兔中枢神经系统内的定位。结果显示,ghrelin免疫阳性细胞在下丘脑、大脑皮质、迷走神经背侧运动核和脊髓腹侧角内均有分布;在下丘脑分布于弓状核、腹内侧核、室旁核、背内侧核和外侧区。   3.用RT-PCR研究了兔ghrelin基因的克隆及其mRNA在体内的表达。从兔胃中提取总RNA,根据Genbank上已发表的猪ghrelin mRNA序列设计合成引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得了目的片段,随后将目的片段克隆于pMD18-T载体上,经大肠杆菌DH5a转化鉴定正确后进行序列测定,得到326 bp目的片段,经验证分析该序列为兔ghrelin基因的部分片段,并将其登录在Genbank上,基因登录号为EF566009。随后对兔体内ghrelin基因的表达进行了研究,结果显示,ghrelin mRNA在兔大脑、下丘脑、垂体、脑干、脊髓、胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、心、肝、脾,肺、肾、睾丸、卵巢和下颌腺等组织器官中均有表达,该结果与在其它动物上获得的结果基本相似,表明ghrelin在进化上是保守的。本文为深入研究ghrdin在兔体内的生理功能奠定了基础。
其他文献
体育中考制度的推行可以敦促初中学生加强身体机能锻炼,提高体育项目的参与度,提升学生的体育素养.本文结合体育中考对农村学校体育教学的影响,提出了改善体育中考模式,推进
随着现代素质教育体系的不断健全,核心素养已经成为当前教育环境中最重要的培养内容,不仅要在教学过程中为学生建立基本的知识结构,还要让学生具备良好的能力框架与学习本能,
现如今科技不断变革,互联网也在高速发展,不断推动着教学模式的变革,互联网与教学之间的融合更加紧密.互联网中丰富的信息资源为教师的教学课程提供便利.同时也可以扩大学生
区域游戏是教师设置一定情境,提供一些操作材料,让幼儿发挥一定自主性的游戏,它有利于培养幼儿动手能力、思考能力、合作能力.本文将探讨区域游戏的意义以及区域游戏开展的优
新课改对初中英语教学要求的提高,为广大英语教师的教学工作带来了新的挑战.现代教育背景下的初中英语课堂教学,不仅仅是知识传递的重要场所,更应该是英语核心素养以及学生学
本文通过建立阿维菌素(Avermectin,AVM)在水体、底泥、水草、异育银鲫和中华绒螯蟹组织中的超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,研究了不同药浴方式下阿维菌素在异育银鲫
核心教育是当前我国教育发展中所提出教育要求,是我国教育部门对各级教育体系所提出的最新要求.小学作为我国基础教育阶段,需要让学生养成良好的学习习惯,并为学生后续学习发
摘要: 近30年来,语言教育界对自主学习越来越重视。英语自主学习能力的提高对于地方高校大学生来说,并非简单的直线过程。本文通过对地方高校自主学习现状的分析提出了一些对策和建议。  关键词: 自主学习 现状 因素 对策和建议    1.引言  自主学习是近年来外语教育界研究的热点,也是今后外语教学的新趋势。地方高校大学生相对来说自主学习能力较差,毕业后面临的冲击和挑战更大。培养其英语自主学习能力就显
工业炸药爆炸产物的毒性,依产物中一氧化碳和一氧化氨的含量而定。当用乌格列尼特Э-6和格拉莫尼特等炸药时,爆破后在工作面会感觉到氨的臭味。氨气是一种有强烈窒息臭味的
汝果欲学诗,功夫在诗外,华夏五千年文明造就了很多不朽的诗句篇章,近两年来国家对传统文化的学习愈发重视,古诗词已经成为语文教学的重点.小学生接触文言文较少,但是古诗词更