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背景与目的:
卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,死亡率居妇科恶性肿瘤之首。近年来,随着人均寿命的延长,科学技术突飞猛进的发展,以及卵巢癌的诊断方法的不断改进,卵巢癌的检出率逐年上升,但由于卵巢癌早期无明显症状及体征,亦无特异度和敏感度均高的肿瘤标志物及其它诊断方法,故卵巢癌被发现时往往已到晚期,尽管其治疗方法已经得到明显改进,但卵巢癌的死亡率仍是居高不下,且呈逐年上升趋势,因此如何能早期发现、早期诊断卵巢癌以及其正确有效的治疗方法成为人们关注的焦点。原癌基因Pim-1是Pim基因家族(现发现的有Pim-1、Pim-2、Pim-3)中的一员,最早在莫洛尼小鼠白血病病毒(Moloneymurine leukemia virus,MoMuLV)诱导的T-细胞淋巴瘤中发现[1],其编码的Pim-1激酶是一种丝／苏氨酸激酶(serine／threonine kinase),研究证实该激酶的过表达与许多肿瘤如白血病、淋巴瘤、前列腺癌[2]和胃癌[3]等的发生、发展有关。原癌基因C-myc编码一种核磷酸蛋白,已有研究表明,其在卵巢癌组织中高表达[4]。但关于Pim-1基因与其蛋白在卵巢癌组织中的表达,以及Pim-1和C-myc在卵巢癌组织中的相关性的研究国内外尚未见报道。本研究用半定量RT-PCR方法和免疫组织化学方法检测卵巢上皮性癌组织中Pim-1和C-myc的表达情况,并探讨两者与卵巢上皮性癌发生、发展的关系。
材料与方法:
1、研究对象:选取2008年10月-2010年3月郑州大学第一附属医院收治入院的病人共70例,按性质分为3组:卵巢上皮性癌患者40例(恶性组),患者年龄36-70岁,中位年龄51.0岁,其中:浆液性囊腺癌29例、粘液性囊腺癌11例,Ⅰ-Ⅱ期14例、Ⅲ-Ⅳ期26例,有淋巴结转移的为23例、无淋巴结转移的为17例；卵巢上皮良性肿瘤患者20例(良性组),患者年龄30-69岁,中位年龄47.5岁；(因子宫肌瘤而行卵巢切除患者)正常卵巢组织对照组10例(正常组),患者年龄45-68岁,中位年龄50.5岁,三组病例年龄无统计学差异(P>0.05)。所有入选病例均除外其他肿瘤病史,术前均未进行放疗、化疗,且术后均经病理科确诊。取所有入选病例术中切除的新鲜卵巢组织标本,并将其分作两份,一份立即放入液氮中保存,用于做半定量RT-PCR；另一份用10％甲醛溶液固定、石蜡包埋,用于做免疫组化。
2、实验方法:采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法和免疫组织化学方法检测卵巢上皮性癌组织、卵巢上皮性良性肿瘤组织和卵巢正常组织标本中Pim-1、C-myc基因及蛋白的表达情况。
3、统计学分析:应用SPSS16.0统计软件分析:定量资料统计学分析应用Kruskal-Wallis检验法,定性资料统计学分析应用x2检验,相关性分析采用Spearman等级相关,以a=0.05为检验水准。
结果:
1、Pim-1 mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达水平(1.241±0.203、72.5％)均明显高于两者在卵巢上皮性良性肿瘤组织中的表达(0.539±0.064、35.0％)及卵巢正常组织中的表达(0.009±0.001、10.O％),差异均具有统计学意义(P均=0.000)。
2、C-myc mRNA和蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达水平(0.832±0.097、65.0％)明显高于其在卵巢上皮性良性肿瘤组织中的表达(0.447±0.038、25.0％)及卵巢正常组织中的表达(0.006±0.001、0.0％),差异均具有统计学意义(P均=0.000)。
3、Pim-1蛋白在浆液性、粘液性卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为69.0％、81.8％,差异无统计学意义(P=0.677)；Pim-1蛋白在Ⅰ-Ⅱ期、Ⅲ-Ⅳ期卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为50.0％、84.6％,差异有统计学意义(P=0.049);Pim-1蛋白在有、无淋巴结转移的卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为82.6％、52.9％,差异有统计学意义(P=0.043)。
4、C-myc蛋白在浆液性和粘液性卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为58.6％和81.8％,差异均无统计学意义(P=0.316)；C-myc蛋白在Ⅰ-Ⅱ期、有淋巴结转移的卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率分别为57.1％、69.6％,分别与Ⅲ-Ⅳ期、无淋巴结转移的卵巢上皮性癌组织中的69.2％、58.8％相比差异均无统计学意义(P=0.445,P=0.481)。
5、卵巢上皮性癌组织中Pim-1和C-myc蛋白同时阳性表达的为23例、同时无表达的为8例,通过统计学分析显示两者存在明显的相关性,且为正相关(r=0.487,P=0.007)。
结论:
1、Pim-1和C-myc可能与卵巢上皮性癌的发生有关。
2、Pim-1可能和卵巢上皮性癌的浸润转移相关,而C-myc与卵巢上皮性癌的进展不存在明显相关性。
3、Pim-1与C-myc在卵巢上皮性癌的恶性转化的进程中可能起协同作用。