【摘 要】
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目的检测LDOC1在结肠癌中的表达情况,并研究其对结肠癌的生物学功能的影响及相关分子机制。为结肠癌的早期诊断和有效治疗提供新的靶点。方法通过实时荧光定量PCR和免疫组化
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目的检测LDOC1在结肠癌中的表达情况,并研究其对结肠癌的生物学功能的影响及相关分子机制。为结肠癌的早期诊断和有效治疗提供新的靶点。方法通过实时荧光定量PCR和免疫组化方法检测LDOC1在结肠癌组织中的表达情况,再利用RT-PCR方法检测LDOC1在结肠癌细胞中的表达情况。将LDOC1过表达慢病毒和空病毒转染至Caco2和HCT-116结肠癌细胞后,通过RT-PCR和western-bolt检测转染效率,运用CCK-8、克隆形成、流式细胞术、Transwell等实验,分别检测LDOC1对细胞增殖、周期、凋亡、迁移和侵袭的影响。通过Western-blot和细胞免疫荧光检测凋亡相关蛋白、Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关分子的表达。最后加入Wnt通路激活剂IM-12后,通过Western-blot实验再次检测Wnt/β-catenin信号通路及EMT相关分子的表达。结果LDOC1在结肠癌组织和4株结肠癌细胞中均呈现出低表达。过表达LDOC1后,Caco2和HCT-116细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低,细胞周期阻滞而凋亡率明显增加。同时,过表达LDOC1后,促凋亡蛋白明显增加而抑凋亡蛋白明显减少。此外,过表达LDOC1后,明显抑制了Wnt/β-catenin信号通路的激活和结肠癌细胞的上皮间质性转化(EMT),最后抑制了结肠癌细胞的转移。结论LDOC1在结肠癌中呈现出低表达,过表达LDOC1后可通过抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活来抑制结肠癌细胞的生物学行为,从而为结肠癌患者的诊断和治疗提供新的策略。
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