醋酸铅对雌性小鼠生殖与胚胎发育的影响及机制研究

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随着全球经济社会化和工业化的快速发展,铅作为工业上一种广泛应用的重金属,由此造成的环境污染已经成为全球高度关注的热点问题。铅在体内的半衰期比较长,可以长期蓄积在动物和人体内,对动物和人类的生殖系统造成严重性的危害。如何消除或降低铅对动物和人类的危害已成为生产中急需解决的问题。本试验通过对雌性小鼠饮用不同剂量的醋酸铅溶液,探究醋酸铅对雌性小鼠生长发育、卵巢、子宫组织结构及早期胚胎发育的影响,同时通过荧光定量法检测Bcl-2、Bax、P53的表达量,拟从分子水平揭示醋酸铅对雌性小鼠生殖系统的危害,为特种经济动物,以及牛、羊等家畜,甚至可为人类铅生殖毒理研究和临床上性成熟前动物慢性铅中毒的防治提供参考性和基础性资料。研究结果如下:(1)不同剂量醋酸铅对雌性小鼠胚胎发育的影响通过雌性小鼠饮用不同剂量醋酸铅溶液构建中毒模型,研究醋酸铅对母鼠生殖与胚胎发育的影响。结果显示:900 mg/L剂量染毒组的平均采卵数显著低于600 mg/L剂量染毒组、300 mg/L剂量染毒组与对照组(P<0.05),而300mg/L剂量染毒组、600 mg/L剂量染毒组与对照组相比差异不显著(P>0.05);900 mg/L剂量染毒组的平均获胚数与平均桑椹胚和囊胚数均显著低于600 mg/L剂量染毒组(P<0.05)、且均极显著低于300 mg/L剂量染毒组与对照组(P<0.01),600 mg/L剂量染毒组的这两项指标又均显著低300mg/L剂量染毒组与对照组,而300mg/L剂量染毒组与对照组的平均获胚数与平均桑椹胚和囊胚数相比差异不显著(P>0.05);900 mg/L剂量染毒组的平均退化胚和延迟胚数显著高于600 mg/L剂量染毒组、300 mg/L剂量染毒组与对照组(P<0.05),而其它剂量组与对照组相比差异不显著(P>0.05);900 mg/L剂量染毒组与600 mg/L剂量染毒组的平均未受精卵数差异不显著(P>0.05),但显著高于300mg/L剂量染毒组与对照组(P<0.05),而300 mg/L剂量染毒组与对照组差异不显著(P>0.05)。研究结果说明随着醋酸铅染毒剂量的不断增高,胚胎总数在不断减少,桑椹胚和囊胚的数量不断减少,而延迟胚和退化胚以及未受精卵数不断增加,由此说明醋酸铅抑制了胚胎的正常发育。(2)不同剂量醋酸铅对激素含量及雌性小鼠受胎、产仔的影响由于小鼠长期饮用醋酸铅溶液,铅导致雌性小鼠卵巢的机能受到伤害,引起黄体分泌孕酮的量会显著下降,结果显示:900mg/L剂量染毒组与600 mg/L剂量染毒组的孕酮浓度差异不显著(P>0.05),但显著低于300mg/L剂量染毒组与对照组(P<0.05),而300 mg/L剂量染毒组与对照组差异不显著(P>0.05);这可能是引起胚胎发育延迟及退化的最主要原因,最终影响雌性小鼠的受胎率和产仔数。(3)不同剂量醋酸铅对P53、Bax、Bcl-2基因表达量的影响进入体内的醋酸铅可直接作用于卵巢组织,对生殖系统影响而言,首先是醋酸铅诱导基因调控来影响卵巢颗粒细胞的调亡,致使雌激素分泌减少,通过定量PCR法检测Bcl-2、Bax和P53的表达量,结果表明:醋酸铅可上调卵巢颗粒细胞中促凋亡基因P53和Bax的表达量,下调抑细胞凋亡基因Bcl-2的表达量,诱导卵巢颗粒细胞凋亡,使胚胎的正常发育受到抑制作用。
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