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目的:研究常用温补肾阳中药主要成分对小鼠肾上腺皮质细胞、睾丸间质细胞和垂体细胞内分泌功能的影响。 方法:(1)以Y1小鼠肾上腺皮质瘤细胞、TM3小鼠睾丸间质细胞、AtT20垂体瘤细胞为实验对象，分别采用10μM～320μM淫羊藿苷、仙茅苷、松脂醇二葡萄糖苷、金丝桃苷、补骨脂素、松果菊苷、耐斯糖和蛇床子素干预Y1细胞、TM3细胞、AtT20细胞72h，通过MTT/CCK法检测细胞增殖情况。(2)采用各中药主要成分的相应浓度干预Y1细胞、TM3细胞和AtT20细胞24h后，运用实时荧光定量PCR技术检测皮质酮合成过程关键酶(Star、Cyp11a1、Cyp11b1)与促肾上腺皮质激素受体(Mc2r)基因表达，睾酮合成过程关键酶(Star、Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b2)与黄体生成素受体(Lhr)基因表达，垂体分泌相关激素的重要功能基因(Pomc、Gnrhr、Lhb、Fshb)的基因表达;采用Western blot技术检测各激素合成有关蛋白(CYP11A1、StAR、SRB1、CYP17A1、hCGR、POMC(ACTH))的蛋白表达;并采用ELISA试剂盒检测不同细胞分泌至培养上清液中激素（皮质酮，睾酮，促肾上腺皮质激素）含量。(3)通过剂量递减饮水给药的方式复制氢化可的松小鼠阳虚证模型，共计造模15天，造模一周后将造模组随机分为模型组、淫羊藿苷组、蛇床子素组、补骨脂素组，并设立正常对照组。于造模第8天开始采用淫羊藿苷（100mg/kg/d）、蛇床子素（20mg/kg/d）、补骨脂素(20mg/kg/d)分别给予对应药物灌胃治疗4周。采用导师课题组研制的小鼠四诊工作站技术与方法标准采集小鼠四诊信息，检测造模1周及药物治疗4周后小鼠证候表现与小鼠脾脏和胸腺脏器变化，并运用组织切片技术观察小鼠肾上腺皮质层病理变化;采用实时荧光定量PCR检测肾上腺皮质激素合成过程重要分子(Srb1、Star、Cyp11a1、Hsd3b1、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2、Mc2r)基因表达;采用ELISA试剂盒检测垂体分泌ACTH和睾丸分泌睾酮水平。 结果:(1)与对照组比较，大于40μM淫羊藿苷、大于160μM蛇床子素、大于320μM补骨脂素干预72h，显著抑制Y1细胞增殖(P≤0.05);大于20μM淫羊藿苷、大于10μM松脂醇二葡萄糖苷、大于80μM补骨脂素、大于160μM蛇床子素、大于320μM松果菊苷干预72h，显著抑制TM3细胞增殖(P≤0.05);大于160μM淫羊藿苷、大于40μM松脂醇二葡萄糖苷、大于80μM补骨脂素、大于160μM蛇床子素、大于160μM松果菊苷、大于320μM金丝桃苷干预72h，显著抑制AtT20细胞增殖(P≤0.05)。(2)与对照组比较，10μM淫羊藿苷、蛇床子素和补骨脂素可轻度促进Y1细胞皮质酮分泌，但无统计学差异;40μM蛇床子素在hCG诱导下显著促进TM3细胞睾酮分泌(P≤0.05);不同温补肾阳中药主要成分对ACTH分泌无明显影响。(3)与对照组比较，淫羊藿苷、仙茅苷抑制Y1细胞Star、Cyp11a1、Cyp11b1基因表达(P≤0.05)，松果菊苷、耐斯糖和蛇床子素显著促进Star、Cyp11a1、Cyp11b1基因表达(P≤0.05)，松脂醇二葡萄糖苷显著促进Star、Cyp11a1基因表达(P≤0.05)，补骨脂素显著促进Cyp11a1、Cyp11b1基因表达(P≤0.05);蛇床子素具有促进Y1细胞StAR蛋白表达作用。(4)干预TM3细胞24h，与对照组比较，淫羊藿苷、补骨脂素显著促进Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b2、Lhr基因表达(P≤0.05)，耐斯糖、蛇床子素显著促进Star、Cyp11a1、Cyp17a1、Hsd3b2、Lhr基因表达(P≤0.05)，金丝桃苷、松果菊苷显著促进Cyp17a1、Lhr基因表达(P≤0.05)，仙茅苷显著促进Cyp11a1、Hsd3b2、Lhr基因表达（P≤0.05）。然而，各中药主要成分对TM3细胞CYP17A1蛋白表达无明显的影响。(5)干预AtT20细胞24h，与对照组比较，淫羊藿苷显著促进Gnrhr和Lhb基因表达(P≤0.05)，金丝桃苷、耐斯糖、蛇床子素显著促进Pomc、Gnrhr和Lhb基因表达(P≤0.05)，补骨脂素显著促进Pomc、Gnrhr基因表达(P≤0.05)，仙茅苷抑制Gnrhr基因表达，松脂醇二葡萄糖苷抑制Pomc基因表达。然而40μM各中药主要成分对POMC剪切蛋白ACTH表达无明显的影响。(6)与正常对照组比较，氢化可的松剂量递减造模1周后小鼠可表现出一派虚弱症状、小鼠脾脏及胸腺均明显萎缩，肾上腺皮质萎缩明显，肾上腺皮质激素合成酶Star、Cyp11a1、Hsd3b1、Cyp21a1、Cyp11b1、Cyp11b2等基因表达显著下降(P≤0.05)，血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和睾酮含量显著下降（P≤0.05）。(7)采用淫羊藿苷、补骨脂素和蛇床子素治疗4周后，与正常对照组比较，氢化可的松造模组小鼠具有明显的自我恢复能力，小鼠脾脏与胸腺由萎缩状态恢复正常状态，肾上腺皮质Cyp11b1和Cyp11b2基因表达由被抑制状态恢复至正常，而Star、Cyp11a1、Cyp21a1和Mc2r基因表达的恢复较弱，且血清ACTH和睾酮仍然处于低分泌状态。与氢化可的松组比较，淫羊藿苷、蛇床子素和补骨脂素对血清ACTH和睾酮含量无明显的提升作用，对肾上腺皮质激素合成酶基因表达也无明显的影响。 结论:(1)淫羊藿苷、蛇床子素和补骨脂素具有抑制Y1、TM3和AtT20小鼠内分泌细胞增殖的作用;(2)温补肾阳中药主要成分对Y1、TM3及AtT20小鼠内分泌细胞激素分泌的影响总体较弱。(3)不同温补肾阳中药主要成分对体外培养的小鼠内分泌细胞皮质酮合成酶、睾酮合成酶以及垂体激素分泌重要基因的表达具有不同的调控作用，提示不同温补肾阳中药主要成分作用的差异特征。(4)采用氢化可的松剂量递减口服给药方式可以复制稳定的虚证模型，定位于肾与脾。淫羊藿苷、蛇床子素和补骨脂素对氢化可的松小鼠虚证促恢复作用较弱。