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目的:探讨电离辐射(Ionizing Radiation,IR)在下咽癌FaDu细胞发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用,以及下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR(FaDu radioresistance)放疗抗性和EMT的相关性及基本机制。寻找关键作用靶点,期望通过逆转EMT达到增加放射敏感性的目的。方法:1.观察IR后下咽癌FaDu细胞以及下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR的形态;细胞划痕实验和Transwell侵袭迁移实验检测IR后FaDu以及FaDuRR细胞的侵袭迁移能力;Western blot和Real Time PCR实验检测IR后FaDu以及FaDuRR细胞EMT相关标志物和AKT/GSK-3β/Snail通路蛋白和mRNA水平的表达;免疫组化实验检测临床病例中对放疗抵抗的下咽癌组织以及对放疗敏感的下咽癌组织中EMT相关标志物和转录因子Snail的表达;平板克隆实验检测IR后FaDu以及FaDuRR细胞对放射线的敏感性。2.采用小干扰RNA沉默技术沉默下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR中EMT关键转录因子Snail的表达;Western blot和Real Time PCR实验检测FaDuRR细胞的EMT相关标志物、转录因子Snail和相关凋亡蛋白蛋白和mRNA水平的表达;细胞划痕实验和Transwell侵袭迁移实验检测沉默Snail后FaDuRR细胞的侵袭迁移能力;平板克隆实验检测FaDuRR细胞的放疗敏感性;流式细胞术实验检测si-Snail联合IR后FaDuRR细胞的凋亡率。结果:1.IR后下咽癌FaDu和FaDuRR细胞形态由路砖性,细胞连接紧密变狭长,伸出伪足,有纺锤丝出现,细胞间隙增大;与亲本细胞相比,IR后FaDu和FaDuRR细胞侵袭迁移能力增加;与亲本细胞相比,IR后FaDu细胞和FaDuRR细胞E-cadherin表达减少,N-cadherin、Vimentin、P-AKT、P-GSK-3β和Snail表达增加,AKT和GSK-3β表达没有变化;临床病例中,与对放射治疗敏感的下咽癌病人相比,对放射治疗抵抗的下咽癌病人肿瘤组织中上皮细胞表面标志蛋白E-cadherin表达减少,而间质细胞表面标志蛋白N-cadherin和Vimentin表达增加,转录因子Snail表达增加;与亲本细胞相比,IR后FaDu和FaDuRR细胞放疗抗性显著增加。2.与FaDuRR/si-NC组比较,FaDuRR/si-Snail组上皮细胞表面标志物蛋白E-cadherin表达增加,而间质细胞表面标志物蛋白N-cadherin和Vimentin表达减少;与FaDuRR/si-NC组比较,FaDuRR/si-Snail组细胞侵袭迁移能力减弱;与FaDuRR/si-NC组比较,FaDuRR/si-Snail组放疗敏感性增加;与FaDuRR/si-NC+4Gy组比较,FaDuRR/si-Snail+4Gy组细胞凋亡率增加,同时凋亡相关蛋白Bax和Cleaved caspase3表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2表达减少。结论:1.电离辐射诱导下咽癌FaDu细胞和放疗抵抗细胞FaDuRR发生EMT并增加其侵袭迁移能力;2.电离辐射通过激活AKT/GSK-3β/Snail通路来促进下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR发生EMT改变;3.沉默转录因子Snail的表达能够逆转下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR的EMT并逆转其放疗抗性;4.沉默转录因子Snail的表达是通过促进下咽癌放疗抵抗细胞FaDuRR发生细胞凋亡,从而增加FaDuRR的放射敏感性。