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目的:研究桦木酸(Betulinic acid,BA)对T-2毒素致小鼠睾丸损伤的保护作用及其分子机制,为将BA作为霉菌毒素解毒剂的使用提供重要的理论依据。方法:将60只健康雄性昆明小鼠随机分为6组,即对照组、T-2毒素组、低、中、高剂量(0.25、0.50、1.00mg/kg bw)BA组,以及100mg/kg维生素E组。对照组和T-2毒素组灌服1%的可溶性淀粉溶液,其余低、中、高剂量BA组分别灌服混悬于可溶性淀粉中不同剂量的BA,阳性对照组则连续灌服100 mg/kg·bw的Trolox,1次/d,连续14d后,除对照组注射75%乙醇和PBS混合液(75%乙醇:PBS=1:12.5)外,其余5组均腹腔注射T-2毒素(4mg/kg·bw,1ml 75%乙醇溶解,12.5ml PBS稀释)诱导氧化损伤模型。15h后,麻醉小鼠,摘除眼球采血后脱颈处死,取睾丸和附睾检测以下相关指标:(1)BA对T-2毒素致小鼠睾丸氧化损伤的保护作用:检测睾丸组织中SOD、CAT、T-AOC的活性和GSH、MDA的含量。(2)BA对T-2毒素诱导小鼠睾丸组织细胞凋亡的保护作用:Western Blot检测凋亡相关蛋白STAT3、P-STAT3、JAK2和P-JAK2及其下游Bax、Bcl-2、caspase3蛋白的表达;BA对T-2毒素致小鼠睾丸组织凋亡的保护作用:采用TUNEL法检测睾丸细胞凋亡;应用QPCR方法检测MALAT-1基因的表达。(3)BA对T-2毒素致小鼠睾酮(T)分泌异常的保护作用:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测小鼠睾酮水平。(4)BA对T-2毒素致小鼠睾丸形态结构损伤的保护作用:制作石蜡切片,进行HE染色,观察睾丸细胞形态结构。(5)BA对T-2毒素致小鼠精子活力及形态损伤的保护作用:取附睾,检测精子活率,死亡率及畸形率。结果:(1)与对照组相比,T-2毒素降低睾丸SOD、CAT和T-AOC的活性以及GSH的含量,提高MDA的含量;而与T-2毒素组相比,低、中、高剂量BA能够提升睾丸SOD、CAT和T-AOC的活性以及GSH含量,同时减少MDA的含量。(2)与对照组相比,T-2毒素组中P-JAK2/JAK2比值和P-STAT3/STAT3比值显著上升(P<0.05);Bax/Bcl-2、Cleaved caspase3/Pro caspase3比值极显著上升(P<0.01,P<0.01);T-2毒素组凋亡细胞明显增多;MALAT-1基因的表达量极显著上升(P<0.01)。而与T-2毒素组相比,低、中、高剂量BA组中P-JAK2/JAK2、P-STAT3/STAT3、Bax/Bcl-2、Cleaved caspase3/Pro caspase3比值均显著下降(P<0.05);凋亡细胞数呈剂量依赖式下降;MALAT-1基因的表达量呈极显著下降趋势(P<0.01)。(3)与对照组相比,T-2毒素组睾酮的分泌量降低;而与T-2毒素组相比,低、中、高剂量BA能够引起睾酮的分泌量呈剂量依赖式上升。(4)与对照组相比,T-2毒素组睾丸结构紊乱,睾丸细胞大量坏死消失;而与T-2毒素组相比,低、中、高剂量BA组中,随着剂量的升高,睾丸细胞结构逐渐恢复正常,尤其是高剂量组保护效果最好。(5)与对照组相比,T-2毒素能够降低精子的存活率,提高精子的死亡率和畸形率;而通过添加低、中、高剂量BA预处理之后,能够有效预防T-2毒素造成的睾丸损伤。结论:BA可通过修复氧化应激、调节线粒体凋亡信号通路相关蛋白的表达以及睾酮的分泌,进而预防由T-2毒素造成的睾丸损伤。