母鼠维生素D缺乏对子代鼠肺发育及CyclinD1表达影响的研究

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xbjxbj008
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研究目的:1.观察孕期及哺乳期雌性大鼠维生素D缺乏对子代鼠体重、肺湿重及显微镜下肺组织发育的影响。2.观察大鼠在孕期、哺乳期维生素D缺乏对子代鼠肺组织细胞周期素D1(CylinD1)的表达的影响。3.探讨维生素D缺乏对子代鼠肺发育影响的可能机制。研究方法:未孕未育成年雌性SD大鼠12只,完全随机分配为维生素D缺乏模型组(VDD组)及正常对照组(对照组),每组共6只,两组均予普通饲料试喂养2周,缺D组予完全避光、不含维生素D饲料喂养,正常组予正常光照、普通饲料喂养,2周后,与成年雄性SD大鼠(6只)以2:1比例合笼交配,以观察到雌鼠阴栓当天记为受孕第1天,建立孕鼠VitD缺乏模型。利用竞争性酶联免疫吸附试验技术(ELISA)分别检测母鼠产前喂养2周及产后21天血清25二羟维生素D3(25-(OH)-D3)的水平。分别用电子分析天平称出生后第1、7、14、21天子代鼠体重,并取肺组织,用分析天平称取肺湿重,苏木精-伊红染色(HE染色)后光镜下分别观察肺组织形态结构,免疫组化法分别检测肺组织中CyclinD1蛋白的表达。研究结果:1.母鼠血清25-(OH)-D3的水平分析:两组母鼠试喂养2周后,VDD组与对照组血清25-(OH)-D3水平差异无统计学意义(P>0.05);母鼠产后21天,VDD组血清25-(OH)-D3水平低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);VDD组产后21天血清25-(OH)-D3的水平明显低于试喂2周,差异有统计学意义(P<0.05);对照组试喂2周及产后21天血清25-(OH)-D3的水平差异无统计学意义(P>0.05)。2.子代鼠体重分析:VDD组与对照组小鼠体重逐渐增长,各日龄两组体重差异无统计学意义(P>0.05)。3.子代鼠肺湿重分析:VDD组与对照组子代鼠肺湿重逐渐增长,生后第7、14、21天肺湿重VDD组低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),第1天两组肺湿重差异无统计学意义(P>0.05)。4.HE染色后光镜下子代鼠肺组织结构病理学改变:光镜下同日龄VDD组子代鼠肺组织结构较对照组肺泡间隔增宽,肺泡组织较少,肺泡小而不规则,终末细支气管及小支气管形态不规则,发育不良。3.CyclinD1表达的分析:VDD组及对照组均在支气管黏膜上皮细胞表达明显,对照组CyclinD1在生后第1天表达最强,第7、14、21天逐渐减弱,而VDD组CyclinD1在生后第7天表达最强,高于对照组(P<0.05),第1天表达低于对照组(P<0.05),第14、21天逐渐减弱,均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究结论:1.母鼠孕期、哺乳期VitD缺乏对子代鼠体重、生后第1天肺湿重影响不明显,降低了生后第7、14、21天仔鼠肺湿重。2.母鼠孕期、哺乳期VitD缺乏延缓了子代鼠的肺发育过程。3.母鼠孕期及哺乳期VitD缺乏推迟了子代鼠肺组织CyclinD1表达高峰,延缓了CyclinD1表达的衰减过程。4.CyclinD1参与肺组织细胞的增殖,CyclinD1表达延迟可能是母鼠VitD缺乏抑制子代鼠肺发育的可能机制之一。
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