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慢性髓系白血病（CML）特征性的BCR／ABL融合基因产物p210BCR／ABL异常增高的蛋白酪氨酸激酶（PTK）活性在CML病理发生中起关键作用。我们实验室应用基因重组技术构建了逆转录病毒载体MSCV-ib-IRES-eGFP，在真核细胞内表达针对ABL蛋白酪氨酸激酶活性域的基因工程单链抗体（sFv），又称为胞内抗体（intrabody）。为探讨应用胞内抗体技术抑制BCR／ABL PTK活性，阻断BCR／ABL信号转导途径，深入研究ABL蛋白酪氨酸激酶活性改变影响CML细胞凋亡特性的机制，并为最终用于临床治疗CML提供实验依据，本论文进行了以下几个方面的工作： 1．将逆转录病毒载体MSCV-ib-IRES-eGFP在原核系统扩增后转染包装细胞，制备出具有感染能力的病毒。用病毒上清转导BCR／ABL基因阳性的K562慢性髓系白血病细胞系，建立了表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶胞内抗体的体外细胞模型。 2．研究胞内抗体在K562细胞内表达后，细胞总蛋白、p210BCR／ABL蛋白、c-ABL(p145ABL)蛋白酪氨酸激酶活性的变化，细胞凋亡特性的改变以及对细胞增殖、细胞内周期蛋白cyclin D2表达量、细胞周期时相分布的影响。 3．将表达胞内抗体的K562细胞接种裸鼠体内，通过动物实验研究胞内抗体对K562细胞体内致瘤性的的影响。 结果，获得纯化的表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体（简称ib）和增强型绿色荧光蛋白（eGFP）的细胞模型：K562-ib-eGFP。该细胞内p210BCR／ABL和p145ABL蛋白表达水平无明显降低，但p210BCR／ABL和p145ABL酪氨酸激酶活性较未转导的K562细胞下降达76％（P＜0.05），细胞总蛋白酪氨酸激酶活性也下降48％（P＜0.05），提示胞内抗体在细胞内获得了正确折叠，并对靶蛋白PTK活性起到明