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背景：姜黄素是传统中药姜黄的主要成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤以及心血管保护等多种生物学功能。尽管姜黄素的这些生物学作用的内在机制并未阐明，但其抗氧化作用显示为其最重要的核心作用。多项研究提示，在不同的心血管氧化损伤模型中，姜黄素可减少活性氧的生成以及减轻脂质过氧化。内皮细胞功能障碍是动脉粥样硬化、高血压、冠心病等疾病发生发展的关键步骤，同时研究发现，姜黄素可减轻血管内皮损伤，而对其内在机制，并未阐明。自噬是一种高度保守的细胞内过程，主要表现为分解长寿蛋白以及循环利用细胞器。自噬诱导的细胞保护是自噬在真核细胞中的基本功能，然而，氧化应激可引起过量的自噬从而导致疾病状态。激活状态的自噬可以是有益的，也可以是有害的。自噬在各种心脏疾病中起不同作用，激活有益的自噬是其用于心血管疾病治疗的关键。诱导自噬抑制凋亡很可能是姜黄素抗氧化应激的作用机制。PI3 K/Akt/mTOR途径是调节自噬在细胞存活、增殖和分化过程中的具有重要作用，mTOR是氨基酸、ATP和激素的受体，能够抑制自噬。营养不良或者直接使用雷帕霉素可以抑制mTOR，由此可以激活ATG1，促进自噬发生。通过调节mTOR通路，凋亡和自噬可以在多种细胞进行调整。 目的：以血管内皮细胞EA-hy926细胞系为研究对象，通过H2O2干预构建的细胞氧化损伤模型，观察姜黄素对血管内皮细胞氧化损伤的作用及凋亡、自噬的影响，探讨其中可能的相关机制，为其进一步应用于临床提供依据。 方法：以200μmol/l H2O2处理EA-hy926内皮细胞4h，构建心肌氧化损伤模型。并用姜黄素预处理4h，采用CCK-8检测细胞存活率，Hoechst33258，流式细胞术检测细胞凋亡，JC-1评价线粒体膜电位，利用FITC-LC3荧光显微镜检测自噬发生，同时应用免疫印迹(Western Blotting)检测凋亡、自噬相关蛋白以及通路蛋白的表达情况。 结果：⑴与正常对照组相比较，姜黄素(0，5，10，20，30，40μmol/l)孵育细胞4小时，对细胞的生存率无明显影响。而在此浓度范围内，姜黄素孵育4小时后，与200μmol/lH2O2共孵育4小时，可显著减轻H2O2对细胞生存率的影响，并且呈浓度依赖性，具有统计学意义(P＜0.05)。⑵与正常对照组相比，200μmol/l H2O2显著增加细胞培养液中的LDH含量，而姜黄素可减少H2O2引起的LDH含量的增加，即减轻H2O2引起的细胞氧化应激性死亡，具有统计学意义(P＜0.05)。⑶正常对照组显示一定比例的红色荧光以及绿色荧光;而CCCP作为线粒体电子传递链抑制剂，干预后作为线粒体膜电位下降的阳性对照，完全显示为绿色荧光;200μmol/l H2O2干预组显示有一定的红色荧光，而绿色荧光较正常对照组明显增强;10μmol/l姜黄素预处理后，绿色荧光较H2O2干预组减弱，具有统计学意义(P＜0.05)。⑷正常对照组，细胞存在一定比例的凋亡现象，200μmol/l H2O2干预组，可明显增加凋亡细胞比例，具有统计学意义(P＜0.05);姜黄素不同浓度的预处理，可不同程度减轻H2O2引起的细胞凋亡，具有一定的统计学意义(P＜0.05)。⑸流式细胞仪以Annexin-Ⅴ(+)PI(-)标示早期凋亡细胞，Annexin-Ⅴ(+)PI(+)标示晚期凋亡和坏死细胞。正常对照组存在一定比例凋亡细胞，200μmol/lH2O2干预组，凋亡细胞比例明显增加，具有统计学意义(P＜0.05);姜黄素预处理，5μmol/l姜黄素预处理组，凋亡细胞比例较H2O2干预组显著减低，具有统计学意义(P＜0.05)，而姜黄素浓度增加为20μmol/l，可进一步降低凋亡细胞的比例，具有一定的统计学意义(P＜0.05)。⑹正常对照组存在一定的基础水平的自噬，而雷帕霉素作为自噬诱导剂，其干预处理作为阳性对照组，显示出强烈的绿色荧光;而H2O2干预，较之正常对照组，并没有改变绿色荧光(P＞0.05)，姜黄素10μmol/l的预处理，显著增加了绿色荧光强度，即增加自噬的发生，较之H2O2组，具有统计学意义(P＜0.05)。⑺通过Western Blot凋亡相关蛋白caspase-3，cleaved-caspase-3，Bcl-2，Bax的表达。H2O2干预后cleaved-caspase-3，Bax表达显著增加，Bcl-2表达显著减少，较之正常对照组，具有统计学意义(P＜0.05)，姜黄素5μmol/l预处理可明显减轻cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2表达的改变，具有统计学意义(P＜0.05)，姜黄素20μmol/l预处理可进一步增强此作用。通过Western Blot检测LC3-Ⅱ/Ⅰ。姜黄素的预处理可以增加LC3-Ⅱ的蛋白表达，具有统计学意义(P＜0.05)，同时，姜黄素20μmol/l的预处理较5μmol/l的预处理组，其促进LC3-Ⅱ蛋白表达的作用进一步增强，具有统计学意义(P＜0.05)。通过Western Blot检测P-Akt，P-mTOR蛋白的表达情况。H2O2的干预显著增加了P-Akt，P-mTOR的表达，具有统计学意义(P＜0.05)，而姜黄素预处理可明显减轻Akt，mTOR的磷酸化水平，具有统计学意义(P＜0.05)。 结论：①姜黄素可减轻内皮细胞的氧化损伤，提高细胞生存率。②姜黄素通过激活细胞自噬抑制细胞凋亡从而减轻内皮氧化损伤。③姜黄素是通过调节Akt/mTOR途径发挥抗氧化作用的。