【摘 要】
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从环境中分离筛选了一株果胶酶高产菌株草酸青霉BZH-2002和一株黑曲霉菌株PE-1650.分别优化了它们的果胶酶高产率固态发酵条件,草酸青霉BZH-2002的内切果胶酶产率可达1.2×10
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从环境中分离筛选了一株果胶酶高产菌株草酸青霉BZH-2002和一株黑曲霉菌株PE-1650.分别优化了它们的果胶酶高产率固态发酵条件,草酸青霉BZH-2002的内切果胶酶产率可达1.2×10<5>u/g甜菜渣.黑曲霉PE-1650的内切果胶酶产率可达1.5×10<4>u/g甜菜渣.用甜菜渣粉末制备了果胶酶亲和吸附剂,分别用亲和层析、离子交换柱层析、凝胶过滤柱层析等方法分离纯化了草酸青霉BZH-2002果胶酶,得到三种均一组分,都有内切聚半乳糖醛酸酶活性,分子量都是41kD,它们的K<,m>值分别为:endo-PG Ⅰ为0.78 mg/ml,endo-PGⅡ为1.2 mg/m1,endo-PGⅢ为2.0 mg/ml,它们的最适反应温度和pH各不相同.用阴离子交换柱层析和凝胶过滤部分纯化了黑曲霉果胶酶粗酶液,得到内切聚半乳糖醛酸酶和内切果胶裂解酶组分.分别用溜曲霉827、黑曲霉PE-1650、草酸青霉BZH-2002等菌株发酵合成的果胶酶喷雾处理黄瓜和番茄幼苗,均诱导了植株广谱的抗病性.果胶酶诱导植物抗病效果随使用浓度的增加而增强,并有一定的持效期.果胶酶诱导的黄瓜幼苗组织中过氧化物酶显著增加,并且不同果胶酶诱导的过氧化物同功酶变化不同.巴西蘑菇、香菇以及霉菌菌丝体和孢子的提取物都具有诱导植物抗病的激发子活性.建立了用黄瓜黄化苗快速筛选激发子活性物质的方法.设计了果胶酶固态发酵生产工艺,以甜菜渣、硫酸铵、磷酸盐为主要原料进行固态发酵,发酵后熟物用水浸提果胶酶,离心分离残渣,微滤除去菌体,超滤浓缩酶液(浓缩液即为半成品),超滤透过液回用浸提果胶酶,离心后残渣用于配制饲料.该工艺基本不排放废水、废渣,属于清洁生产工艺.
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