D-乳酸高产菌株的诱变选育及其发酵条件的优化

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该论文首先确定D-乳酸定性及定量的分析方法,然后利用菌体的菌学特性以及遗传特性进行了菌种的选育,最后系统地对突变株摇瓶最佳培养条件进行了研究.该论文选用了紫外诱变和硫酸二乙酯相结合的复合诱变方法,对出发菌株(Sporolactocillus inulinus)BME126进行了诱变筛选,得一高产突变株SP-BME126M,产D-乳酸61.8g/L,比出发菌株提高了45%,经测定发酵液中D-乳酸纯度为98.5%.利用正交实验确定了最佳种子培养基和培养条件以及最佳的发酵培养基和培养条件.最佳种子培养基为(g/L):葡萄糖30.0,蛋白胨20.0,酵母抽提物20.0,牛肉膏5.0,吐温-80 1mL,KH<,2>PO<,4>0.2、K<,2>HPO<,4>0.3、NaAc·3H<,2>O 1.0、柠檬酸三铵2.0、MgSO<,4>·7H<,2>O 0.01、MnSO<,4>·4H<,2>O 0.01、NaCl 0.01、FeSO<,4>·7H<,2>O 0.01.最佳培养条件:37℃,装液量100/250mL,一次性添加碳酸钙10g/L,种子培养时间为24h.最佳发酵培养基(g/L):葡萄糖100.0,蛋白胨20.0,酵母抽提物20.0,牛肉膏5.0,吐温801mL,KH<,2>PO<,4> 0.2、K<,2>HPO<,4>0.3、NaAc·3H<,2>O 1.0、柠檬酸三铵2.0、MgSO<,4>·7H<,2>O 0.01、MnSO<,4>·4H<,2>O 0.01、NaCl 0.01、FeSO<,4>·7H<,2>O 0.01.最佳发酵培养条件:37℃,装液量100/250mL,一次性添加碳酸钙50g/L,接种量5%,在最适发酵条件下,突变株SP-BME126M最终产D-乳酸为82.8g/L.
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