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鸡白痢（Pullorum disease,PD）是家禽生产中较为严重的肠道疾病之一,主要通过抗生素防治该病,虽取得显著地效果,但长期使用能产生耐药性菌株与药物残留。为此,人们进行了相关替代药物的研究,其中包括抗菌肽（Antimicrobial peptides,AMPs）。抗菌肽是生物体防御外界病原体侵袭时产生的一类具有抗菌作用的小分子多肽,其抑菌作用机制不同于抗生素,不会在动物体内产生药物残留,也不易使病原菌产生耐药性。基于此,本研究通过鸡白痢沙门氏菌诱导蝇蛆,粗提蝇蛆抗菌肽,检测其抑菌活性,并用于治疗人工感染的白痢鸡,测定治疗过程中白痢鸡十二指肠、空肠和回肠乳酸杆菌数量、肠黏膜免疫细胞（肥大细胞、淋巴细胞和杯状细胞）数量变化和小肠黏膜细胞因子（TGF-β4和TNF-α）m RNA表达水平,综合分析蝇蛆抗菌肽和抗生素（庆大霉素）治疗白痢病鸡后对鸡小肠乳酸杆菌、免疫细胞及免疫因子表达的差异,研究结果如下:1.利用BCA标准蛋白法测定蝇蛆抗菌肽粗提液浓度的试验结果显示:法经鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌诱导蝇蛆都能显著增加蝇蛆体内抗菌肽的表达水平,大肠杆菌与鸡白痢沙门氏菌诱导蝇蛆产生的抗菌肽浓度差异不显著（P>0.05）,但均显著高于未经诱导的蝇蛆抗菌肽（24.17±4.65μg/μL）（P<0.05）。药敏纸片法检测蝇蛆抗菌肽的抑菌活性试验结果显示:鸡白痢沙门氏菌诱导蝇蛆抗菌肽组抑菌圈直径（21.06±0.87 mm）显著大于未诱导蝇蛆抗菌肽组（16.41±0.51 mm）（P<0.05）。微量肉汤稀释法检测诱导蝇蛆抗菌肽组对鸡白痢沙门氏菌的最小抑菌浓度为3.0 mg/L。2.通过蝇蛆抗菌肽（3 mL,1 mg AMP/mL）和抗生素（庆大霉素,100 mg/L）治疗14日龄人工感染的白痢病鸡,分别收集诱导蝇蛆抗菌肽组、未诱导蝇蛆抗菌肽组、抗生素组、蝇蛆活体组、对照组（未治疗）和健康组于治疗3 d、5 d、7 d鸡的十二指肠、空肠和回肠组织,测定鸡小肠乳酸杆菌数量、肠黏膜免疫细胞（肥大细胞、淋巴细胞和杯状细胞）数量以及小肠黏膜细胞因子TGF-β4和TNF-αmRNA的表达。（1）治疗后用MRS培养基（乳酸杆菌选择性培养基）检测各试验组鸡小肠乳酸杆菌数量的结果显示,抗生素组和对照组（未治疗）鸡乳酸杆菌数量均显著低于健康组（P<0.05）,而诱导蝇蛆抗菌肽组与健康组差异不显著（P>0.05）,表明鸡感染白痢后小肠乳酸杆菌数量低于正常,应用诱导蝇蛆抗菌肽治疗鸡白痢后能增加鸡小肠乳酸杆菌数量,而抗生素治疗白痢后导致鸡小肠乳酸杆菌数量降低。（2）采用石蜡切片甲苯胺蓝染色法研究各试验组小肠肥大细胞的数量变化发现:对照组（未治疗）鸡小肠肥大细胞数量高于健康组;抗生素组鸡十二指肠肥大细胞数量显著低于健康组（P<0.05）;诱导蝇蛆抗菌肽组鸡的回肠内肥大细胞显著高于健康组（P<0.05）。采用石蜡切片HE染色法研究鸡小肠淋巴细胞和杯状细胞数量变化发现:对照组（未治疗）鸡小肠淋巴细胞数量低于健康组,抗生素组鸡小肠淋巴细胞数量在治疗第3 d时显著低于健康组（P<0.05）,诱导蝇蛆抗菌肽组鸡的淋巴细胞数量与健康组差异不显著（P>0.05）;对照组（未治疗）鸡小肠杯状细胞数量高于健康组,诱导蝇蛆抗菌肽组鸡十二指肠杯状细胞数量显著低于健康组（P<0.05）,抗生素组鸡的十二指肠和回肠杯状细胞数量显著低于健康组（P<0.05）。以上结果表明,鸡感染白痢后引起鸡小肠肥大细胞和杯状细胞数量增加、淋巴细胞数量降低;应用抗生素治疗白痢后导致鸡十二指肠肥大细胞数量降低、十二指肠和回肠杯状细胞数量降低,在治疗第3 d时小肠各段淋巴细胞数量降低;而诱导蝇蛆抗菌肽治疗白痢后鸡回肠肥大细胞数量增加、十二指肠杯状细胞数量降低。（3）通过qRT-PCR法检测各试验组鸡小肠各段TGF-β4和TNF-αmRNA表达水平的结果发现:抗生素组鸡十二指肠的TGF-β4 mRNA表达水平高于其它试验组;各试验组鸡回肠的TGF-β4 mRNA表达水平较低,诱导和未诱导蝇蛆抗菌肽组鸡的TGF-β4 mRNA表达水平均高于抗生素组,但差异不显著（P>0.05）;未诱导蝇蛆抗菌肽组空肠TGF-β4 mRNA的表达水平极显著高于抗生素组（P<0.01）。蝇蛆抗菌肽治疗鸡白痢过程中,诱导蝇蛆抗菌肽组鸡空肠黏膜TNF-αmRNA表达显著高于抗生素组（P<0.05）,于治疗5 d时,诱导蝇蛆抗菌肽组鸡的TNF-αmRNA表达水平最高。以上结果表明,应用抗生素治疗鸡白痢促进十二指肠黏膜TGF-β4 mRNA的表达,而蝇蛆抗菌肽治疗白痢后促进鸡回肠TGF-β4 m RNA的表达;应用诱导蝇蛆抗菌肽治疗鸡白痢后空肠TNF-αmRNA表达水平高于抗生素治疗,尤其在治疗第5 d时,诱导蝇蛆抗菌肽空肠TNF-αmRNA表达水平差异最明显。基于以上试验结果说明,蝇蛆抗菌肽对由鸡白痢沙门氏菌引起的鸡白痢病有一定的治疗效果,具有替代传统抗生素成为新型治疗药物的潜力,同时也为应对抗生素的滥用和细菌耐药性方面提供了新的方向,因此,蝇蛆抗菌肽有望成为新的饲料添加剂运用于养禽业防治疾病,并为禽类养殖过程中出现的鸡白痢病治疗提供一定的科学依据和理论基础。