【摘 要】
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该文主要从水稻未成熟花粉的离体成熟培养,水稻花粉离体萌发以及花粉特异表达基 因的启动子的分离与克隆三个方面开展研究,为建立水稻花粉的遗传转化系统打基础 .游离的以及
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该文主要从水稻未成熟花粉的离体成熟培养,水稻花粉离体萌发以及花粉特异表达基 因的启动子的分离与克隆三个方面开展研究,为建立水稻花粉的遗传转化系统打基础 .游离的以及花药悬浮培养中的小孢子,在人工设计的液体培养基的培养下,实现了 正的发育途径,形成充满淀粉的下沉三核花粉.属于黄败类型的水稻雄性不育系K17A ,在离体培养状态下,也能实现下沉的发育,形成成熟的花粉.利用水稻花粉特异表 达基因(PS1)起始密码子上游启动区序列设计和合成一对引物,以水稻幼苗总DNA为模 板,扩增出一条约500bp片段.将该片段插入pBinpKGT植物表达载体启动子探针GUS+NOS3的上游构成表达载体.经农杆菌转化烟草花粉,24小时培养后,作瞬时表达检测 ,结果表明,该克隆的片段具有启动功能.DNA序列分析表明,所克隆的启动片段长度为526bp,含有TATA盒和CAAT盒.同PS1中动子序列比较,同源性为52％,部分顺式调 控元件相同.
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