论文部分内容阅读
第一部分:甘氨酸转运酶拮抗剂的关键中间体合成随着抑郁症发病率的增加，人们加大对此病症的研究力度，发现甘氨酸转运酶抑制剂能够缓解抑郁患者的临床症状。近年来很多制药公司注册了甘氨酸转运酶抑制剂类化合物，并积极寻找疗效更佳的抑制剂。本文合成(2S，4R)-4-(1，1-二甲氧基乙基)-2-羟甲基-4-甲基吡咯烷-1-甲酸苄基酯为多种甘氨酸转运酶抑制剂关键手性中间体。 乙酰胺与丙酮酸甲酯发生亲核加成反应，通过优化反应溶剂、反应时间以及除水方法，得出以甲苯作为溶剂、使用Dean-Stark管回流除水、反应26h时，产物2-乙酰氨基丙烯酸甲酯1的收率较高为67％，并开发化合物1的HPLC与ESI-MS方法。 2-甲基乙酰乙酸乙酯与苯乙胺的亲核加成反应，最佳反应条件为2-甲基乙酰乙酸乙酯∶苯乙胺=1∶1.2并使用D-S管回流除水，产物(S，Z)-2-甲基-3-（苯乙胺基）-2-丁烯酸乙酯2收率为77％。开发其HPLC分析方法，得de＞96％，并研究化合物2的LC-ESI-MS测试的影响因素。 利用Micheal手性加成反应，构建连接化合物1与化合物2的碳链，得到产物(2S，4S)-4-乙酰氨基-2-乙酰基-2-甲基-戊二酸甲乙酯4。优化Micheal加成反应的溶剂与反应时间，得出THF作为溶剂、反应3d时，收率达到45％。开发化合物4的HPLC与ESI-MS分析方法，得de＞95％。 化合物4在氨气环境下成环形成(2S，4S)-4-乙酰基-4-甲基-5-氧代吡咯烷-2-甲酰胺6，优化反应温度与时间，得在反应温度30℃与反应时间为2.5h时候收率为39％。开发化合物6的手性HPLC与ESI-MS分析方法，得ee＞96％，de＞95％。 利用原甲酸三甲酯在甲醇作为溶剂下保护化合物6上羰基，同时醇解化合物6上的酰胺基团得到(2S，4S)-4-（1，1-二甲氧基乙基）-4-甲基-5-氧代吡咯烷-2-羧酸甲酯7。优化反应温度与时间，得在回流条件下反应12h时，收率较好为47％。开发化合物7的HPLC与ESI-MS分析方法，得de＞96％。 一锅法还原环内酰胺，并用Cbz-C1保护氨基，得到(2S，4R)-4-（1，1-二甲氧基乙基）-2-羟甲基-4-甲基毗咯烷-1-甲酸苄基酯9，优化LiAlH4添加量与反应时间，得到10eqiv的LiAlH4下反应12h，收率较好达到39％。 第二部分:肝素钠生产过程中质量监控方法研究肝素钠是在临床上广泛应用的抗凝血药物，是我国最大生化出口原料。2008年发生的“肝素钠多硫酸软骨素事件”给我国原料药生产商带来负面影响。科学的质量体系是我国原料药走上世界与制药巨头竞争的基石。 本文利用核磁共振氢谱、HPLC-SAX技术监控肝素钠污染物OSCS（多硫酸软骨素），方法具有高可靠性、准确度与精密度。开发出分子量测试范围远大于USP与EP标准的体积排阻色谱方法监控肝素的分子量。开发出肝素钠粗品的样品前处理方法，有效降低肝素钠粗品对SAX色谱柱的污染，使粗品中OSCS监控同样可以使用HPLC-SAX完成。开发肝素钠抗Ⅱa因子活性与抗Xa因子活性的凝血分析方法，该法测试过程简单快速，并且具有高重复性、准确度与精密度。