超声缓解癌性肠梗阻的试验研究

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恶性肿瘤(即癌症)是中国乃至全球性的重大公共卫生问题,癌性肠梗阻(malignant bowel obstruction,MBO)是癌症患者中常见的并发症之一,平均生存期<4个月。癌性肠梗阻最有效的治疗手段是外科手术,但多数患者因病程晚期体质差、术后复发腹腔内易粘连,或年龄大、长时间治疗经济负担重等无法接受。传统的内科保守治疗,如禁食、胃肠减压及输液、抗感染等,时间较长、疗效欠佳,病情缓解不甚。对无法耐受手术并且其他治疗方法效果不佳的患者,久治不愈会导致病情恶化,出现肠穿孔坏死、败血症、菌血症和腹膜炎等全身或局部炎症反应以及电解质紊乱。本课题组前期研究发现超声治疗仪可能对癌性肠肠梗阻患者的肠梗阻症状有缓解作用。超声治疗是一种操作方便,无创伤、无毒副作用的治疗方法,且耐受度好、适应人群广,对于身体虚弱、不能耐受或不适于手术的老年患者也能进行治疗。因此本研究从三级预防的角度出发,用已在临床使用的超声治疗仪为干预手段,以结肠癌癌性肠梗阻动物模型和癌性肠梗阻患者为研究对象,探讨超声辐射缓解癌性肠梗阻的可行性和有效性,以期为无法耐受手术且常规治疗方法效果不佳的晚期癌性肠梗阻病人,探寻一种简单、方便、无创、安全、有效、适用性广的治疗方式,来防止和延缓疾病的进一步恶化,提高晚期及终末期癌性肠梗阻患者的生存质量,降低给家庭和社会带来的负担。研究方法1.结肠癌癌性肠梗阻动物模型的建立将75只BALb/c小鼠随机分为三组,分别为:对照组、模型组、假手术组,各组25只。模型组:将小鼠麻醉开腹后,把小鼠CT26结肠癌细胞注入小鼠的降结肠部位内使其先形成肿瘤,再进一步形成肠梗阻的方法建立结肠癌癌性肠梗阻动物模型。假手术组:除用生理盐水替代小鼠CT26结肠癌细胞,其余均采用和模型组相同的手术操作步骤;对照组:不做处理。每天测量小鼠的进食量、排便量、体重,分别在0天、6天、12天、18天、24天时,在对照组、模型组、假手术组中各麻醉5只老鼠,测量腹围后,开腹观察肠道大体观,并测量造模上段肠管周径,取造模段肠管组织做HE染色,最后处死老鼠。通过观察比较三组小鼠进食量、排便量、体重、腹围、造模上段肠管周径,肿瘤形成情况评价模型的建立情况。2.超声辐射缓解结肠癌癌性肠梗阻动物模型的实验研究实验动物分组包括:(1)处理组:处理组1、处理组2(分别于造模18天后用超声辐射连续治疗2d、4d,10min/d),(2)模型组:模型组1、模型组2(分别于造模18天后继续观察2d、4d),(3)对照组:对照组1、对照组2(未造模且不做任何处理,仅继续观察2d、4d),各小组10只。通过测量小鼠进食量、排便量、体重、腹围、造模上段肠管周径和造模上段结肠诱导型一氧化氮合酶i NOS和酪氨酸激酶受体c-kit分布和表达,分析超声辐射对模型小鼠的影响。3.超声缓解癌性肠梗阻的临床试验研究受试者来源于2017年5月-2019年3月在泰州市人民医院肿瘤科住院的癌性肠梗阻患者,将符合纳入排除标准的病人,采用随机数字表分为治疗组与对照组。对照组采用常规的支持治疗,治疗组采用常规治疗外加超声治疗,完善患者的病史以及治疗史,记录治疗前和治疗周期内每天入组的患者的腹痛、腹胀、恶心、呕吐、体力状况(KPS)评分、排气、排便情况。研究结果1.结肠癌癌性肠梗阻动物模型建立假手术组小鼠进食量、排便量、体重、腹围、造模上段肠管周径与对照组小鼠的变化趋势基本一致,在观察期间内差异均无统计学意义(P>0.05)。在造模后12天、15天、18天、21天、24天模型组的进食量和排便量小于对照组、假手术组,差异均有统计学意义(P<0.05)。造模12天、15天、18天、21天、24天,对照组、假手术组小鼠的体重明显高于模型组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。造模后12天、18天、24天测量,模型组的腹围、造模上段肠管周径大于对照组、假手术组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。对小鼠造模段结肠区域进行HE染色。结果显示,小鼠模型组中造模后12天有肿瘤细胞侵润,而假手术组、对照组结肠中没有病变的情况,表明结肠部位肿瘤种植成功。综上,对照组和假手术组中各观察指标变化趋势基本一致,表明造模手术过程对小鼠的影响小。模型组与对照组、假手术组相比出现进食量、排便量下降,腹围增大和造模上段肠管扩张等肠梗阻的征象,造模段肠管成瘤有效且带瘤能成活。表明结肠癌癌性肠梗阻动物模型建立成功。2.超声缓解结肠癌癌性肠梗阻动物模型的实验研究2.1超声缓解结肠癌癌性肠梗阻动物模型的效果超声处理结肠癌癌性肠梗阻模型小鼠,随着超声辐射时间(天数)的增加,超声处理组模型小鼠进食量、排便量呈上升趋势。处理组小鼠的进食量和粪便排放量多于相对应观察时间模型组小鼠的进食量、排便量,差异有统计学意义(P<0.05)。随着超声辐射时间(天数)的增加,处理组模型小鼠腹围和造模上段肠管周径逐渐减小。处理组小鼠的腹围和造模上段肠管周径小于相对应观察时间模型组小鼠的腹围和造模上段肠管周径,差异有统计学意义(P<0.05)。超声处理组的体重与相对应观察时间模型组小鼠的体重差异没有统计学意义(P>0.05)。表明超声可有效缓解处理组小鼠的肠梗阻。2.2超声处理前后结肠癌癌性肠梗阻模型小鼠造模上段结肠中i NOS和c-kit分布和表达情况随着超声辐射时间(天数)的增加,处理组小鼠造模上段结肠c-kit表达逐渐增加,与相对应观察时间模型组小鼠的造模上段结肠表达c-kit相比明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。而随着超声时间(天数)的增加,处理组小鼠造模上段结肠i NOS表达逐渐减小,与相对应观察时间模型组小鼠的造模上段结肠i NOS表达相比明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。超声处理后,处理组与模型组相比造模上段肠管中的c-kit阳性表达逐渐增加,而i NOS表达逐渐减少,间接反映超声缓解癌性肠梗阻,可能与超声降低了肠道抑制性神经递质NO的含量,使肠道起搏细胞ICC恢复活性有关。3.超声治疗癌性肠梗阻的临床试验结果2017年5月-2019年3月在泰州市人民医院肿瘤科符合纳入排除标准,自愿参加本试验的受试者共113人,对照组59例,治疗组54例,试验过程中对照组中有4例病人因病情加重,退出试验。最终收集到的可用数据共109例,其中治疗组54例,对照组55例。用多水平模型分析重复测量的腹痛、腹胀、恶心、呕吐、KPS评分的情况,治疗组患者和对照组患者相比,治疗组随着治疗时间(天数)的增加,腹痛、腹胀、恶心、呕吐症状逐渐减轻,而KPS评分逐渐增高。治疗前对照组和治疗组排气、排便的情况,经统计分析差异没有统计学意义(P>0.05)。治疗后治疗组的通气、通便情况人数多于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组患者经一个周期超声治疗后,有10例完全缓解的病例,32例好转,6例稳定,6例无效,有效率88.89%;对照组患者经过一个周期治疗后,有2例完全缓解的病例,9例好转,16例稳定,28例无效,有效率49.1%,对照组和治疗组疗效的分布情况差异有统计学意义(P<0.05)。提示超声能有效缓解癌性肠梗阻病人的肠梗阻症状。结论1.通过和对照组、假手术组相比,模型组符合建模成功的标准,表明小鼠结肠癌癌性肠梗阻模型建立成功。2.超声处理后,处理组小鼠的肠梗阻情况得到了缓解,造模上端肠管结肠组织中的iNOS阳性表达降低,c-kit阳性表达增加,表明超声可有效缓解模型小鼠的肠梗阻,其作用可能与超声降低了肠道抑制性神经递质NO含量,使肠道起搏细胞ICC恢复活性有关。3.和对照组患者相比,治疗组患者随着治疗时间(天数)的增加,腹痛、腹胀、恶心、呕吐症状逐渐减轻,而KPS评分逐渐增高。超声治疗后治疗组的通气、通便情况人数多于对照组。治疗组的临床疗效的有效率高于对照组。
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